Anti-gespaltene Caspase-1 p20 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P29466

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Caspase-1

• Caspase-1 ist eine Thiolprotease der Caspase-Familie, kodiert durch das CASP1-Gen (auch bekannt als IL1BC, ICE). Sie wird als inaktives Zymogen (p45) synthetisiert, das proteolytisch in die aktiven Untereinheiten p20 und p10 gespalten wird.
• Spielt eine zentrale Rolle bei Entzündungsreaktionen, indem es die Vorläuferformen von Interleukin-1 beta (pro-IL1B) und Interleukin-18 (pro-IL18) nach der Assemblierung von Inflammasomkomplexen zu ihren biologisch aktiven reifen Zytokinen spaltet. Verwandte Referenzen: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• Darüber hinaus initiiert Caspase-1 die Pyroptose, eine lytische programmierte Zelltodart, durch Spaltung von Gasdermin-D (GSDMD), wobei ein N-terminales Fragment entsteht, das Membranporen bildet. Verwandte Referenzen: PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Während bakterieller Infektionen spaltet und aktiviert Caspase-1 Caspase-7 (CASP7), was zur Reparatur der Plasmamembran beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:22464733
• In der antiviralen Immunität steuert Caspase-1 DNA-virusinduzierte Reaktionen durch Spaltung und Inaktivierung der zyklischen GMP-AMP-Synthase (CGAS). Verwandte Referenzen: PMID:28314590
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma und Zellmembran, was mit ihrer Rolle bei der Zytokinverarbeitung und der Ausführung der Pyroptose übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression ist breit verteilt, mit höheren Gehalten in Milz und Lunge; nachweisbare Mengen finden sich in Leber, Herz, Dünndarm, Dickdarm, Thymus, Prostata, Skelettmuskel, peripheren Blutleukozyten, Niere und Hoden; im Gehirn fehlt die Expression.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und Isopeptidbindungsbildung; seine Aktivierung erfolgt durch intermolekulare autoproteolytische Prozessierung; es gehört zur Peptidase-C14A-Familie.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen dieses monoklonalen Antikörpers ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 200–300 der p20-Untereinheit von menschlicher Caspase-1 entspricht. Diese Region ist voraussichtlich in der gespaltenen, aktiven Form des Enzyms zugänglich.
• Für die Western-Blot (WB)-Analyse bereiten Sie Zell- oder Gewebslysate unter reduzierenden Bedingungen vor. Erwägen Sie die Verwendung bekannter Induktoren der Caspase-1-Aktivierung (z. B. NLRP3-Inflammasom-Aktivatoren wie Nigericin oder ATP), um das gespaltene p20-Fragment nachzuweisen. Es wird eine Bande von etwa 20 kDa erwartet, neben potenziellen Volllängen- oder intermediären Proformen.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Capture oder Nachweis von gespaltener Caspase-1 p20 in menschlichem Serum, Plasma oder Zellkulturüberständen verwendet werden; die optimale Verdünnung und Paarung sollte empirisch bestimmt werden.
• Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht berichtet; validieren Sie den Antikörper in den relevanten Probensystemen, wenn andere Spezies als Mensch untersucht werden.
• Angesichts der mehreren angegebenen Proteingewichte (10/29/35/42/45 kDa) stellen diese wahrscheinlich verschiedene Spaltungsintermediate und Isoformen dar; bestätigen Sie die Identität der nachgewiesenen Banden mit geeigneten Kontrollen (z. B. unbehandelte vs. aktivierte Proben).

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