Anti-CKAP5 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q14008

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CKAP5-Funktion und -Lokalisierung

• CKAP5 (Cytoskelett-assoziiertes Protein 5), auch bekannt als ch-TOG (Colonic and hepatic tumor overexpressed gene protein), ist ein großes mikrotubuli-assoziiertes Protein, das vom CKAP5-Gen (GenID: 9793) kodiert wird und ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~225 kDa aufweist.
• Es wirkt als prozessive Mikrotubuli-Polymerase, bindet an die Plus-Enden der Mikrotubuli und fördert die Nukleation und Elongation zytoplasmatischer Mikrotubuli.
• CKAP5 spielt eine kritische Rolle bei der Zusammenbau des mitotischen Spindels, indem es die Spindelpole organisiert und Kinetochor-Mikrotubuli vor Depolymerisation schützt.
• Es ist eine Komponente des TACC3/ch-TOG/Clathrin-Komplexes, der die Kinetochor-Fasern des mitotischen Spindels stabilisiert, indem er als intermikrotubuläre Brücke wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:23532825
• CKAP5 verstärkt die Stärke der durch den NDC80-Komplex vermittelten Kinetochor-Spitzen-Mikrotubuli-Verbindungen. Verwandte Referenzen: PMID:27156448
• Subzellulär lokalisiert sich CKAP5 während der Zellteilung im Zytoplasma, am Zentrosom, an den Spindelpolen und an den Kinetochoren.
• Die Expression ist in Leber- und Dickdarmtumoren sowie in den Purkinje-Zellkörpern des Kleinhirns erhöht, mit einer weit verbreiteten Gewebeverteilung einschließlich Skelettmuskel, Gehirn, Herz, Plazenta, Lunge, Leber, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1763-2032 von humanem CKAP5; daher erkennt der Antikörper möglicherweise Epitope innerhalb dieser C-terminalen Region. Ziehen Sie die Verwendung geeigneter positiver Kontrollen (z. B. HeLa-, HEK293-Zelllysate) für WB in Betracht.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts (225 kDa) stellen Sie sicher, dass SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten für Western Blots verwendet werden.
• Für Immunfluoreszenz-Anwendungen erwarten Sie Färbemuster, die mit Mikrotubuli-Netzwerken, Zentrosomen und mitotischen Spindeln konsistent sind. Eine Co-Färbung mit zentrosomalen Markern (z. B. γ-Tubulin) kann helfen, die Lokalisierung zu bestätigen.
• Aufgrund seiner polyklonalen Natur sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überprüft werden, und eine Antikörper-Titration wird für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis empfohlen.

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