Anti-CKAP4 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q07065

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CKAP4-Funktion und Lokalisierung

• Cytoskeleton-associated protein 4 (CKAP4), auch bekannt als p63, CLIMP-63 oder ERGIC-63, ist ein 63–66 kDa Typ II Transmembranprotein, das vorwiegend im rauen endoplasmatischen Retikulum (ER) lokalisiert ist.
• CKAP4 dient als hochaffiner epithelialer Zelloberflächenrezeptor für antiproliferativen Faktor (APF) und leitet antiproliferative Signale nach Ligandenbindung weiter.
• Es vermittelt die Verankerung des ER am Mikrotubuli-Zytoskelett und trägt so zur Aufrechterhaltung der ER-Morphologie und des intrazellulären Transports bei.
• Eine große cytoplasmatische Coiled-Coil-Domäne ermöglicht Oligomerisierung und Mikrotubuli-Interaktion, während eine kurze luminale Domäne an Protein-Protein-Wechselwirkungen innerhalb des ER beteiligt sein kann.
• Die subzelluläre Verteilung umfasst die ER-Membran, Plasmamembran, perinukleäres Cytoplasma und das Zytoskelett; das Protein pendelt zwischen dem ER und der Zelloberfläche.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Palmitoylierung und Acetylierung regulieren CKAP4s Funktion, Lokalisierung und Stabilität.
• CKAP4 wird als Lipoprotein mit einem Signalanker-Transmembransegment klassifiziert, was seine Rolle in der Membrandynamik unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 130–400, einschließlich der cytoplasmatischen Coiled-Coil-Domäne; diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert, was die Arten-Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot (WB) ist ein Band nahe 66 kDa zu erwarten; validieren Sie die Spezifität unter Verwendung von Zelllinien mit nachgewiesener CKAP4-Expression und geeigneten Kontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz (IF)/ICC optimieren Sie die Permeabilisierung, um sowohl ER- als auch Plasmamembran-Pools zu detektieren; färben Sie mit Organellen-Markern (z.B. Calnexin für ER) nach, um die Lokalisierung zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Verwendung von rekombinantem CKAP4-Protein als Standard vorteilhaft sein; berücksichtigen Sie Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnung für ein optimales Signal.
• Überprüfen Sie die Antikörperleistung im relevanten Proben system, da die Epitopzugänglichkeit je nach Fixierung oder Proteinkontext variieren kann.

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