Anti-Citrat-Synthase Kaninchen mAb für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75390

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Citrat-Synthase

• Das Zielprotein ist Citratsynthase, ein mitochondriales Enzym der Transferase-Familie, genauer gesagt der Acyltransferasen, die Acylgruppen bei der Übertragung in Alkylgruppen umwandeln.
• Es katalysiert die Kondensation von Acetyl-Coenzym A und Oxalacetat zu Citrat – der ersten und geschwindigkeitsbestimmenden Reaktion des Tricarbonsäurezyklus (TCA-Zyklus), einem zentralen Weg der Energiegewinnung.
• Dieses Enzym ist ausschließlich in der mitochondrialen Matrix lokalisiert, wo der TCA-Zyklus abläuft und Vorläufermoleküle für die oxidative Phosphorylierung bereitgestellt werden.
• Als Schlüsselenzym des TCA-Zyklus wird die Citratsynthase-Aktivität häufig als Marker für den mitochondrialen Gehalt und die oxidative Kapazität in Geweben verwendet.
• Das Enzym erfährt mehrere posttranslationale Modifikationen, darunter Acetylierung, Methylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Aktivität modulieren können.
• Das Protein wurde ausführlich durch kristallographische Studien (3D-Struktur verfügbar) und direkte Proteinsequenzierung charakterisiert, wobei seine molekulare Masse von etwa 52 kDa bestätigt wurde (berechnet ~52 kDa aus NP_004068.2).

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 28–145 der menschlichen Citrat-Synthase, einer Region, die wahrscheinlich nach der mitochondrialen Prozessierung exponiert ist – dies spricht für die Erkennung der reifen endogenen Form.
• Für das Western Blotting ist eine Bande nahe 52 kDa zu erwarten; die Beladung mit mitochondrial angereicherten Fraktionen oder die Verwendung von Ganzzelllysaten aus metabolisch aktiven Geweben kann die Detektion verbessern.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) sorgen Sie für eine ausreichende Antigen-Retrieval und erwägen Sie die Validierung des Signals in Geweben mit hoher mitochondrialer Dichte (z. B. Herz, Skelettmuskel).
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus- und Ratten-Citratsynthase ermöglicht Studien an gängigen vorklinischen Modellen; verwenden Sie immer passende Positiv- und Negativkontrollen für jede Anwendung.
• Für ELISA-Anwendungen sollten optimale Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnungen empirisch unter Verwendung von rekombinanter Citratsynthase als Standard bestimmt werden.

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