Anti-CISD2 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q8N5K1

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CISD2

• CISD2 (CDGSH-Eisen-Schwefel-Domäne-haltiges Protein 2), auch bekannt als ERIS, Miner1 und NAF-1, ist ein Protein aus 135 Aminosäuren mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von etwa 15 kDa.
• Es enthält eine CDGSH-Domäne, die einen 2Fe-2S-Cluster koordiniert, charakteristisch für die mitoNEET-Proteinfamilie.
• CISD2 ist ein wichtiger Regulator der Autophagie und wirkt am endoplasmatischen Retikulum (ER), indem es die Interaktion zwischen BCL2 und BECN1 vermittelt. Diese Interaktion ist für die BCL2-vermittelte Absenkung der ER-Ca²⁺-Speicher während der Autophagie erforderlich.
• Es beteiligt sich an der BIK-initiierten Autophagie, ohne die BIK-abhängige Caspase-Aktivierung zu beeinflussen, was auf eine spezifische Rolle in autophagischen und nicht in apoptotischen Signalwegen hindeutet.
• Das Protein ist sowohl in der ER-Membran als auch in der äußeren Mitochondrienmembran lokalisiert und verbindet diese Organellen bei der Aufrechterhaltung der zellulären Homöostase.
• CISD2 ist an der Kontrolle der Lebensspanne beteiligt. Seine Fehlfunktion steht mit dem Wolfram-Syndrom Typ 2 (WFS2) in Verbindung, einer Erkrankung, die durch Diabetes mellitus und Taubheit gekennzeichnet ist.
• Es wird in zahlreichen Geweben exprimiert, darunter Hoden, Dünndarm, Niere, Lunge, Gehirn, Herz, Bauchspeicheldrüse und Thrombozyten.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 15 kDa zu erwarten. Verwenden Sie ein Lysat als Positivkontrolle aus humanen, murinen oder Ratten-Zelllinien beziehungsweise Geweben, die bekanntermaßen CISD2 exprimieren, beispielsweise Hoden, Niere oder Gehirn.
• Optimieren Sie bei der Immunhistochemie (IHC-P) die Antigen-Retrieval-Bedingungen, beispielsweise die hitzeinduzierte Epitop-Retrieval-Methode in Citratpuffer mit pH 6, und validieren Sie den Antikörper anhand von Gewebeschnitten mit hoher Expression, etwa aus Bauchspeicheldrüse oder Dünndarm.
• Für ELISA sollten Sie beim Aufbau eines Sandwich-Assays die Kombination mit einem CISD2-spezifischen Fangantikörper in Betracht ziehen. Führen Sie eine Schachbretttitration durch, um die optimalen Konzentrationen zu bestimmen.
• Da das Immunogen die Aminosäuren 61–135 umfasst, kann der Antikörper sowohl endogenes als auch rekombinant exprimiertes CISD2 erkennen. Die Kreuzreaktivität mit homologen Proteinen von Maus und Ratte wurde nachgewiesen; für andere Spezies wird jedoch eine zusätzliche Validierung empfohlen.
• Beziehen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen ein, beispielsweise Lysate oder Gewebe mit CISD2-Knockdown, um die Spezifität in Ihrem experimentellen System zu bestätigen.

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