Anti-cIAP2-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13489

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von cIAP2

• Das baculovirale IAP-Repeat-enthaltende Protein 3 (BIRC3), auch bekannt als cIAP2, API2 und hIAP1, gehört zur Familie der Apoptose-Inhibitoren (IAP), die durch das Vorhandensein einer oder mehrerer Baculovirus-IAP-Repeat-(BIR)-Domänen und einer RING-Finger-Domäne gekennzeichnet ist.
• Es fungiert als multifunktionaler Regulator der Apoptose, der Entzündungssignalisierung und der Immunität, indem es als E3-Ubiquitin-Protein-Ligase wirkt und die Ubiquitinierung wichtiger Signalmoleküle wie RIPK1, RIPK2, CASP3, CASP7, CASP8, IKBKE, TRAF1 und BCL10 vermittelt.
• Es reguliert den kanonischen NF-kB-Signalweg positiv, während es die konstitutive Aktivierung des nicht-kanonischen Signalwegs unterdrückt, und trägt dadurch zum Gleichgewicht zwischen Entzündungs- und Zellüberlebensreaktionen bei.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der angeborenen Immunität, indem es Mustererkennungsrezeptoren (PRRs) einschließlich Toll-like-Rezeptoren (TLRs), NOD-like-Rezeptoren (NLRs) und RIG-I-like-Rezeptoren (RLRs) reguliert und dadurch die nachgeschaltete Zytokinproduktion beeinflusst.
• Es schützt Zellen vor der spontanen Assemblierung des Ripoptosoms, eines zelltodinduzierenden Komplexes, durch die Ubiquitinierung von RIPK1 und CASP8.
• Es ist an der Modulation von Zellproliferation, Invasion und Metastasierung beteiligt und verbindet seine Aktivität mit der Krebsbiologie.
• Es ist sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert, was mit seinen vielfältigen Signal- und Regulationsfunktionen übereinstimmt.
• Es wird stark in fetaler Lunge und Niere sowie in lymphatischen Geweben Erwachsener, einschließlich Milz, Thymus und peripherer Blutlymphozyten, exprimiert, was seine Bedeutung für die Entwicklung und Funktion des Immunsystems widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen wurde gegen die Aminosäuren 100–130 des humanen cIAP2 (NP_001156.1) entwickelt, eine Region innerhalb der BIR-Domänen; es wird erwartet, dass der daraus resultierende polyklonale Antikörper das vollständige Protein (~68 kDa) im Western Blot erkennt.
• Für den Western Blot (WB) sollten 5 % Magermilch oder BSA zur Blockierung und eine Inkubation mit dem Primärantikörper über Nacht bei 4 °C verwendet werden; es sollte eine Bande bei etwa 68 kDa nachgewiesen werden. Als Positivkontrollen sollten Lysate von Zellen mit bekannter cIAP2-Expression, beispielsweise lymphatischen Zelllinien, verwendet werden.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigen-Retrieval-Behandlung erforderlich sein; die Färbespezifität sollte anhand von Gewebeschnitten aus Milz oder Thymus validiert und mit normalen IgG-Kontrollen verglichen werden.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte die zytoplasmatische und nukleäre Lokalisation beobachtet werden; eine Ko-Färbung mit Organellmarkern kann die subzelluläre Verteilung bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Beschichtungskonzentrationen und Blockierungsbedingungen sollten für das jeweilige Assay-Format optimiert werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird erwartet; die Leistungsfähigkeit in diesen Spezies sollte jedoch unter den jeweiligen Assay-Bedingungen experimentell überprüft werden.

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