Anti-CHMP2B polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9UQN3

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CHMP2B

• CHMP2B, auch bekannt als CHMP2.5, chromatinmodifizierendes Protein 2b oder Vps2-2, ist ein humanes Protein, das vom CHMP2B-Gen kodiert wird. Es gehört zur Familie der Proteine der geladenen multivesikulären Körperchen und fungiert als Kernkomponente des für den Transport erforderlichen endosomalen Sortierkomplexes III (ESCRT-III).
• Als Bestandteil der ESCRT-III-Maschinerie spielt CHMP2B eine zentrale Rolle bei der Bildung multivesikulärer Körperchen (MVBs) und der Sortierung ubiquitinierter Fracht in intraluminale Vesikel (ILVs) innerhalb später Endosomen. Dieser Prozess leitet Membranproteine, wie beispielsweise aktivierte Wachstumsfaktorrezeptoren, zum lysosomalen Abbau.
• Der ESCRT-III-Komplex vermittelt Membranabschnürungsereignisse nicht nur bei der MVB-Biogenese, sondern auch bei topologisch gleichwertigen Prozessen, einschließlich des abschließenden Abszissionsschritts der Zytokinese und der Knospung umhüllter Viren wie HIV-1.
• CHMP2B ist im Zytosol aktiv und wird an die zytoplasmatische Seite später endosomaler Membranen rekrutiert, wo es sich zu dynamischen Polymeren zusammenlagert, die gemeinsam mit der AAA-ATPase VPS4 die Membraneinstülpung und -spaltung vorantreiben.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen von CHMP2B gehören Acetylierung und Phosphorylierung, die möglicherweise seine Assemblierung, Lokalisation und Funktion innerhalb des ESCRT-Signalwegs regulieren.
• UniProt-Schlüsselwörter weisen auf seine Beteiligung am Proteintransport und an der Endosomenbiologie sowie auf seine Verbindung mit neurodegenerativen Erkrankungen wie amyotropher Lateralsklerose (ALS) und frontotemporaler Demenz hin.
• Das Protein wird in menschlichen Geweben weit verbreitet exprimiert und ist besonders in Hirnregionen (Kleinhirn, Großhirnrinde, Medulla, Rückenmark usw.), Herz, Skelettmuskel, Milz, Niere, Leber und Lunge vorhanden, was seine grundlegende Rolle bei der zellulären Membrandynamik widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den Aminosäuren 1–213 des humanen CHMP2B (NP_054762.2) entspricht. Diese Sequenz umfasst nahezu das vollständige Protein und lässt lediglich eine kurze C-terminale Region aus, weshalb der Antikörper möglicherweise mehrere Epitope erkennt.
• Aufgrund seiner polyklonalen Natur und seines Designs eignet sich dieser Antikörper für die Western-Blot-Analyse (WB) von endogenem CHMP2B in humanen und murinen Proben; eine Bande nahe 24 kDa wird erwartet. Es empfiehlt sich, geeignete positive und negative Kontrollen einzubeziehen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei Immunfluoreszenz (IF) oder Immunzytochemie (ICC) lokalisiert sich CHMP2B im Zytoplasma und ist an späten endosomalen Membranen angereichert. Permeabilisierte Zellpräparate können erforderlich sein, um diesen membranassoziierten Anteil nachzuweisen. Validieren Sie die Färbung im relevanten Zellsystem und ziehen Sie eine Doppelfärbung mit endosomalen Markern in Betracht.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum quantitativen Nachweis eingesetzt werden; die optimalen Arbeitsverdünnungen müssen jedoch empirisch im jeweiligen Assaysystem des Anwenders bestimmt werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus wurde berichtet, wodurch dieser Antikörper für translationale Studien mit Mausmodellen geeignet sein könnte. Anwender sollten die Reaktivität mit ihren spezifischen Versuchst Geweben oder Zelllinien jedoch überprüfen.

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