Anti-Chk1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O14757

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Chk1-Funktion und -Lokalisierung

• Chk1 (Checkpoint-Kinase-1) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die durch das CHEK1-Gen kodiert wird und als Schlüssel-Checkpoint-Kinase im Zellzyklus fungiert.
• Erforderlich für den Checkpoint-vermittelten Zellzyklusarrest und die Aktivierung der DNA-Reparatur als Reaktion auf DNA-Schäden oder nicht replizierte DNA. Verwandte Referenzen: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Erkennt das Substrat-Konsensussequenz [R-X-X-S/T] und phosphoryliert CDC25A, CDC25B und CDC25C, was zu deren Hemmung über 14-3-3-Bindung oder proteasomalen Abbau führt und so den Zellzyklusfortschritt blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:19734889, PMID:20090422
• Phosphoryliert RAD51 an Thr-309, verstärkt dessen Chromatin-Assoziation, um die DNA-Reparatur durch homologe Rekombination zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:15665856
• Phosphoryliert TP53 an mehreren C-terminalen Stellen, fördert die TP53-Aktivierung durch Acetylierung, was zum Zellzyklusarrest und zur Unterdrückung der Proliferation führt. Verwandte Referenzen: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Moduliert die Chromatinassemblierung durch Phosphorylierung von TLK1, verhindert die ASF1A-Phosphorylierung und beteiligt sich an der DNA-Crosslink-Reparatur über FANCE-Phosphorylierung. Verwandte Referenzen: PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:17296736
• Lokalisiert im Zellkern, an Chromosomen, im Zytoplasma und am Zentrosom.
• Ubiquitär exprimiert, mit höchsten Leveln in Thymus, Hoden, Dünndarm und Kolon.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst eine konservierte zentrale Region (aa 148–307) von Chk1, was die Kreuzreaktivität mit humanem, murinem und ratten Chk1 unterstützt. Eine Validierung in der relevanten Spezies wird empfohlen.
• Für Western Blot wird eine Bande um 54 kDa erwartet. Lysate aus Thymus oder Hoden, die hohe Chk1-Level exprimieren, können als positive Kontrollen dienen.
• Bei der Durchführung von IHC-P oder IF/ICC sollte eine Optimierung von Fixierung und Permeabilisierung in Betracht gezogen werden, um den Nachweis von nuklearem und zentrosomalem Chk1 zu verbessern.
• ELISA kann zur Quantifizierung von Chk1 in Zelllysaten oder rekombinanten Proteinpräparationen verwendet werden; eine Kalibrierung gegen eine Standardkurve in der spezifischen Matrix wird empfohlen.

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