Anti-Chk1-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – O14757

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Chk1

• Die von dem CHEK1-Gen codierte Serin/Threonin-Proteinkinase Chk1 wird alternativ gespleißt, wodurch mehrere Isoformen entstehen, darunter eine endogene Repressor-Isoform, die dem Volllängen-Chk1 entgegenwirkt und den Übergang von der S- zur G2/M-Phase fördert.
• Wirkt als kritische Checkpoint-Kinase, die für den Zellzyklusarrest und die Aktivierung der DNA-Reparatur als Reaktion auf DNA-Schäden oder nicht replizierte DNA erforderlich ist, und erkennt dabei die Substrat-Konsensussequenz [R-X-X-S/T]. Zugehörige Referenzen: PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Phosphoryliert CDC25A, CDC25B und CDC25C, wodurch Bindungsstellen für 14-3-3 erzeugt oder die Proteine für die durch NEK11 vermittelte Polyubiquitinierung und den Abbau vorbereitet werden. Dadurch werden CDK-Cyclin-Komplexe inhibiert und der Zellzyklusfortschritt blockiert. Zugehörige Referenzen: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:9278511 PMID:19734889 PMID:20090422
• Verbessert die DNA-Reparatur durch homologe Rekombination mittels Phosphorylierung von RAD51 an Thr-309, wodurch die Freisetzung von RAD51 aus BRCA2 gefördert und seine Chromatinassoziation verstärkt wird. Zugehörige Referenzen: PMID:15665856
• Phosphoryliert das C-Terminusende von TP53, wodurch dessen Acetylierung und Transkriptionsaktivität verstärkt werden, um einen Zellzyklusarrest zu fördern und die Proliferation zu unterdrücken. Zugehörige Referenzen: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Moduliert die Chromatinstruktur und Genexpression durch Phosphorylierung von Histon H3.1 an Thr-11 (H3T11ph), was zu einer epigenetischen Stilllegung einer Untergruppe von Genen führt (aufgrund von Ähnlichkeit).
• Lokalisiert sich im Zellkern, auf Chromosomen, im Zytoplasma und am Zentrosom, was seine vielfältigen Funktionen bei der Kontrolle des Zellzyklus und der Aufrechterhaltung des Genoms widerspiegelt.
• Wird ubiquitär exprimiert, mit den höchsten Konzentrationen im Thymus, in den Hoden, im Dünndarm und im Kolon – Geweben mit hohen Proliferationsraten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–100 am N-Terminus. Es sollte in Betracht gezogen werden, die Epitopspezifität in Ihrem Assaysystem mittels Peptidkonkurrenz oder Deletionsmutanten zu bestätigen.
• Für Western Blot beträgt das erwartete Molekulargewicht etwa 54 kDa. Verwenden Sie ein 10-%-SDS-PAGE-Gel und optimieren Sie die Transferbedingungen für den Nachweis hochmolekularer Proteine.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) kann eine Antigenrückgewinnung mit Citratpuffer (pH 6,0) erforderlich sein. Verwenden Sie Thymus- oder Hodengewebe als positive Kontrollgewebe und Kaninchen-IgG-Isotypen als Negativkontrolle.
• Für ELISA können direkte oder Sandwich-Formate untersucht werden. Zur Validierung der Bindungsspezifität sollten kompetitive Assays mit dem immunisierenden Peptid in Betracht gezogen werden.
• Dieser Antikörper ist für die Reaktivität mit humanem Material validiert. Die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt. Daher wird bei einer Erweiterung auf andere Modelle eine speziesspezifische Validierung empfohlen.

CamelBio: Ihre zentrale Beschaffungsplattform

CamelBio bietet diagnostischen Herstellern und Forschungslaboren umfassenden Zugang zu IVD-Rohmaterialien – von validierten monoklonalen/polyklonalen Antikörpern bis hin zu Hilfsreagenzien in Großgebinden. Dieser Anti-Chk1-Antikörper unterstützt die Entwicklung von Assays für die Onkologie und die genomische Integrität und ergänzt unser Portfolio optimierter Antikörperpaare sowie unsere Kompetenz bei der Beschaffung seltener Zielmoleküle. Nutzen Sie unsere technische Beratung und unser Know-how in der Lieferkette, um Ihr Projekt von der Konzeption bis zur klinischen Anwendung zu beschleunigen.