Anti-Chk1-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O14757

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Chk1-Funktion und -Lokalisierung

• Chk1 (Checkpoint-Kinase 1) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase und ein Mitglied der Proteinkinase-Superfamilie, mit einer konservierten Kinasedomäne und ATP-Bindetasche.
• Sie ist für eine checkpoint-vermittelte Zellzyklusarrest und die Aktivierung der DNA-Reparatur als Reaktion auf DNA-Schäden oder nicht replizierte DNA erforderlich, wobei sie die Substratkonsensussequenz [R-X-X-S/T] erkennt. Verwandte Referenzen: PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Chk1 phosphoryliert die CDC25-Phosphatasen (CDC25A, CDC25B, CDC25C), erstellt 14-3-3-Bindungsstellen und fördert den CDC25A-Abbau, wodurch CDK-Cyclin-Komplexe inhibiert und der Zellzyklusfortschritt blockiert werden. Verwandte Referenzen: PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 ">PMID:9278511 PMID:19734889 PMID:20090422
• Die Phosphorylierung von TP53 an mehreren C-terminalen Stellen durch Chk1 fördert dessen Acetylierung und Aktivierung, was zu einem Zellzyklusarrest und einer Unterdrückung der Proliferation führt. Verwandte Referenzen: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Chk1 spielt direkte Rollen bei der DNA-Reparatur durch Phosphorylierung von RAD51 an Thr-309 (Verbesserung der homologen Rekombination), FANCE (Erleichterung der DNA-Vernetzungsreparatur) und Regulation der Replikationsgabelaufrechterhaltung über PCNA. Verwandte Referenzen: PMID:15665856 PMID:17296736 PMID:18451105
• Chk1 moduliert Chromatin durch Phosphorylierung von TLK1 an Ser-743, wodurch die Phosphorylierung von ASF1A verhindert und die Chromatinassamblierung potenziell verbessert wird, sowie durch Phosphorylierung von Histon H3.1 an Thr11 zur Regulation der Gentranskription. Verwandte Referenzen: PMID:12660173 PMID:12955071
• Eine alternativ gespleißte Isoform von CHEK1 wirkt als endogener Repressor der vollständigen Länge von Chk1 und fördert den Übergang von der S- zur G2/M-Phase durch direkte Interaktion und Antagonisierung.
• Chk1 lokalisiert im Kern, auf Chromosomen, im Zytoplasma und an den Zentrosomen. Es ist ubiquitär exprimiert mit den höchsten Spiegeln in Thymus, Hoden, Dünndarm und Dickdarm.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für das Western Blotting verwenden Sie reduzierende Bedingungen und bereiten Lysate aus Zellen oder Geweben, die bekanntermaßen Chk1 exprimieren, wie Thymus oder Hoden. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~54 kDa; jedoch können posttranslationale Modifikationen zu scheinbaren Verschiebungen führen.
• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 148-307 des humanen Chk1, was innerhalb der Kinasedomäne liegt. Während diese Region in der kanonischen Isoform hoch konserviert ist, wird eine Validierung mit geeigneten Kontrollen empfohlen, um die Reaktivität mit potenziellen alternativen Isoformen zu bewerten.
• Dieser polyklonale Kaninchenantikörper ist für ELISA und WB validiert. Für ELISA-Anwendungen sollten Sie die Verwendung von rekombinantem Chk1-Protein oder -Fragment als Standard in Betracht ziehen und die Antikörperverdünnung und Blockierungsbedingungen für Ihr spezifisches Assay-Format optimieren.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, ist eine Chargen-zu-Chargen-Variabilität möglich. Wir empfehlen, die Leistung in Ihrem experimentellen System zu validieren und geeignete positive und negative Kontrollen einzubeziehen.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsplattform

CamelBio bietet Diagnostikherstellern und Laboratorien eine umfassende Palette an IVD-Rohmaterialien, einschließlich validierter Antikörperpaare, optimierter polyklonaler Antikörper wie dieses Anti-Chk1-Antikörpers, Massenhilfsreagenzien und der Beschaffung seltener Ziele. Mit Expertise, die die gesamte Diagnostikentwicklungspipeline von der Konzeption bis zur Klinik umfasst, unterstützt CamelBio Ihre Forschungsprojekte zu Zellzyklus-Checkpoints und DNA-Schädigungsantwort mit zuverlässiger Rohmaterialversorgung und technischer Beratung. Kontaktieren Sie uns, um zu erfahren, wie unsere One-Stop-Beschaffungsplattform Ihre Assay-Entwicklung rationalisieren kann.