Anti-CHIT1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q13231

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CHIT1-Funktion und Lokalisierung

• CHIT1 kodiert für Chitotriosidase-1, ein sezerniertes Glykoprotein aus der Familie der Glykosyl-Hydrolasen 18, das am Chitinabbau beteiligt ist.
• Das Protein hydrolysiert Chitin, Chitotriose und Chitobiose und spielt eine Rolle bei der Abwehr von chitinhaltigen Pathogenen wie Nematoden.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoform 3, der die enzymatische Aktivität fehlt.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Sekretion in den extrazellulären Raum und das lysosomale Kompartiment.
• Die Gewebeexpression ist prominent in Milz und Makrophagen, was mit einer Immunabwehrfunktion übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für Stabilität und Aktivität essentiell sind.
• Enthält eine Chitin-Bindungsdomäne; klassifiziert unter Hydrolase, Kohlenhydratstoffwechsel und Polysaccharidabbau.
• Direkte Proteinsequenzierungsevidenz unterstützt die Identifizierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 217–466 von humanem CHIT1 und zielt auf die katalytische Domäne ab, schließt aber das Signalpeptid aus. Diese Region könnte sowohl aktive Isoformen als auch die katalytisch inaktive Isoform 3 detektieren, wenn das Epitop konserviert ist.
• Für Western Blotting (WB) sollten Lysate von humanen Makrophagen-Zelllinien oder Milzgewebe als positive Kontrollen in Betracht gezogen werden. Erwartete Bandengröße ~52 kDa; beachten Sie, dass Glykosylierung leichte Wanderungsverschiebungen verursachen kann.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollte die Antikörperleistung an formalinfixierten, paraffineingebetteten humanen Milzschnitten mit geeigneten Antigen-Retrieval-Methoden getestet werden.
• ELISA-Anwendungen können zur Quantifizierung von rekombinantem CHIT1 oder endogenem Protein in biologischen Flüssigkeiten verwendet werden; validieren Sie mit einer Standardkurve unter Verwendung von gereinigtem Protein.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus deutet auf einen Nutzen in Mausmodellen hin; jedoch wird eine Sequenzalignment-Empfehlung zur Bestätigung der Epitop-Konservierung empfohlen.

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