Anti-CHAMP1-Kaninchen-polykolonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q96JM3

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CHAMP1

• CHAMP1 (Chromosome alignment-maintaining phosphoprotein 1), auch als Zinkfingerprotein 828 bekannt, ist ein nukleäres Protein mit einem scheinbaren Molekulargewicht von etwa 89 kDa, das eine entscheidende Rolle bei der mitotischen Chromosomensegregation spielt.
• Es ist für die korrekte Ausrichtung der Chromosomen an der Metaphasenplatte erforderlich und gewährleistet eine präzise Segregation, indem es während der Biorientierung der Schwesterchromatiden die Anheftung der Spindelmikrotubuli an die Kinetochoren aufrechterhält.
• CHAMP1 kann möglicherweise die kinetochor-assoziierten Proteine CENPE (Zentromerprotein E) und CENPF zum Kinetochor rekrutieren und dadurch Mikrotubuli-Kinetochor-Wechselwirkungen erleichtern.
• Das Protein ist im Zellkern lokalisiert und konzentriert sich während der Mitose in der Zentromer-/Kinetochorregion der Chromosomen; außerdem findet es sich in Verbindung mit der mitotischen Spindel und dem zytoplasmatischen Zytoskelett.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die wahrscheinlich seine mitotischen Funktionen regulieren.
• CHAMP1 enthält eine Zinkfingerdomäne, was auf DNA- oder Proteinbindungskapazitäten hindeutet, die zu seiner Funktion bei der Ansteuerung von Chromatin oder Kinetochoren beitragen können.
• Mutationen in CHAMP1 stehen mit geistiger Behinderung (MRD40/NEDHILD) in Zusammenhang und unterstreichen seine Bedeutung für die neurologische Entwicklung und Zellteilung.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Da das Immunogen die Bereiche 563–812 umfasst, erkennt der Antikörper wahrscheinlich sowohl das vollständige CHAMP1 als auch alle Isoformen, die diesen C-terminalen Abschnitt enthalten; die Spezifität sollte in Knockout- oder Knockdown-Systemen validiert werden.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 89 kDa; es sollte ein Gel mit hohem Acrylamidanteil (z. B. 8–10 %) und ausreichender Transferzeit für Proteine mit hohem Molekulargewicht verwendet werden.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC können Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden die Färbung von Kinetochoren und Chromosomen beeinflussen; testen Sie eine Methanol- oder Formaldehydfixierung mit Permeabilisierung durch Triton X-100.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem CHAMP1 und eignet sich daher für Untersuchungen an murinen Zelllinien oder Geweben; die Sequenzübereinstimmung in der Immunogenregion sollte jedoch überprüft werden.
• Führen Sie ELISA-Titrationsexperimente durch, um die optimale Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnung für Sandwich- oder direkte ELISA-Ansätze zu bestimmen.

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