Anti-cGAS-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N884

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: cGAS-Funktion und -Lokalisierung

• Cyclische GMP-AMP-Synthase (cGAS, auch bekannt als MB21D1) ist eine Nukleotidyltransferase mit 522 Aminosäuren, die die Synthese von 2'3'-cGAMP aus ATP und GTP katalysiert und eine zentrale Rolle in der angeborenen Immunität spielt.
  Verwandte Referenzen: PMID:21478870, PMID:23258413, PMID:23707061
• Bei der Bindung an doppelsträngige DNA (dsDNA), die länger als 40 bp ist, durchläuft cGAS eine flüssig-flüssige Phasentrennung und bildet Tröpfchen, die seine katalytische Aktivität zur Produktion von 2'3'-cGAMP verstärken, welches dann als second messenger wirkt, um STING1 zu aktivieren und Typ-I-Interferone zu induzieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794, PMID:30007416
• Als DNA-Sensor erkennt cGAS zytosolische DNA von eindringenden Pathogenen – einschließlich DNA-Viren, Retroviren (z. B. HIV-2) und Bakterien wie Mycobacterium tuberculosis – und löst antimikrobielle Immunreaktionen aus.
  Verwandte Referenzen: PMID:28363908, PMID:35613581, PMID:23929945, PMID:26048138, PMID:24269171, PMID:30270045, PMID:26046437
• In gestressten oder beschädigten Zellen aktiviert endogene DNA, die aus dem Kern oder den Mitochondrien austritt (z. B. während der Seneszenz, des mitotischen Arrests oder einer SARS-CoV-2-Infektion), cGAS und verknüpft es mit steriler Entzündung, Autoimmunität und zellulärer Seneszenz.
  Verwandte Referenzen: PMID:28738408, PMID:28759889, PMID:31299200
• Nukleäres cGAS ist streng reguliert: Die Wechselwirkung mit Nukleosomen blockiert seine DNA-bindende Aktivität, um Autoimmunität zu verhindern, während die Assoziation mit PARP1 die homologe Rekombinations-DNA-Reparatur hemmt.
  Verwandte Referenzen: PMID:31299200, PMID:32911482, PMID:32912999, PMID:30356214, PMID:31544964
• Humanes cGAS zeigt spezies-spezifische DNA-Erkennungseigenschaften und produziert im Vergleich zu anderen Säugetieren niedrigere Mengen an 2'3'-cGAMP, was zu einer feiner abgestimmten Immunantwort beitragen kann.
  Verwandte Referenz: PMID:30007416
• cGAS ist primär zytosolisch, lokalisiert aber auch zum Kern, Chromatin und zur Plasmamembran. Es wird in monozytären Zellen (z. B. THP-1-Linie) exprimiert und unterliegt mehreren post-translationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Palmitoylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 350–522 von humanem cGAS (NP_612450.2) und deckt die C-terminale katalytische Domäne ab. Für Western Blotting ist ein Band bei ca. 59 kDa zu erwarten. Validieren Sie die Spezifität in cGAS-exprimierenden Zelllinien wie THP-1.
• Dieser Antikörper eignet sich zum Nachweis von cGAS in menschlichen, murinen und rattigen Proben mittels WB, IHC-P, IF/ICC und ELISA. Aufgrund der Sequenzkonservierung sollte die Kreuzreaktivität in der betreffenden Spezies überprüft werden.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) wird eine Optimierung der Antigen-Retrieval und der Verdünnung des Primärantikörpers empfohlen. Für IF/ICC können die Permeabilisierungsbedingungen das nukleäre im Vergleich zum zytosolischen Färbemuster beeinflussen.
• Die katalytische Aktivität von cGAS hängt von der DNA-Bindung und der Phasentrennung ab; daher kann der Antikörper verwendet werden, um cGAS-Aktivierungszustände in Verbindung mit biochemischen Assays zu untersuchen.

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