Anti-CENPF polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P49454

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Zentromerproteins F

• Das Zentromerprotein F (CENPF), auch als Mitosin, AH-Antigen und Kinetochorprotein CENPF bekannt, ist ein großes Coiled-Coil-Protein, das für die Chromosomensegregation während der Mitose unerlässlich ist.
• Es wird für die Kinetochorfunktion und die Lokalisation von Dynein, LIS1, NDE1 und NDEL1 am Kinetochor benötigt und ermöglicht dadurch eine korrekte Chromosomenausrichtung und -segregation.
• Über die Mitose hinaus reguliert CENPF das Recycling der Plasmamembran, indem es durch die Verbindung mit STX4 und SNAP25 Recyclingvesikel an das Mikrotubuli-Netzwerk bindet.
• CENPF wirkt als potenzieller Inhibitor von durch Pocket-Proteine vermittelten Prozessen, reguliert die Aktivität von RB-Proteinen während der Zellteilung und -proliferation und spielt eine Rolle im Zellzyklus embryonaler Kardiomyozyten sowie bei der Festlegung der kardialen Zelllinie.
• Das Protein befindet sich in mehreren subzellulären Strukturen, darunter im Zytoplasma (perinukleäre Region), in der Kernmatrix, am Zentromer/Kinetochor und im Spindelapparat.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Prenylierung, die seine Funktion bei der Zellzyklusregulation und Entwicklung modulieren können.
• CENPF wird mit Ziliopathien (primärer Ziliendyskinesie) in Verbindung gebracht und ist an der Regulation der DNA-Synthese sowie an der Skelettmuskelmyogenese beteiligt.
• Es trägt außerdem zur dendritischen zellvermittelten T-Zell-Immunität gegen Chlamydien bei.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht einer Region nahe dem C-Terminus des menschlichen CENPF und kann daher für den Nachweis des Volllängenproteins und potenzieller Isoformen geeignet sein.
• Aufgrund des hohen vorhergesagten Molekulargewichts (ca. 358 kDa) sollten geeignete Bedingungen für die Gelelektrophorese verwendet werden, beispielsweise Polyacrylamidgele mit niedrigem Acrylamidanteil und verlängerte Transferzeiten beim Western Blot.
• Für den ELISA sollte die Verwendung des rekombinanten Proteins oder von Zelllysaten aus menschlichen oder Mausproben zur Validierung der Antikörperspezifität in Betracht gezogen werden.
• Da CENPF in sich teilenden Zellen exprimiert wird, sollten proliferierende Zelllinien oder Gewebe verwendet werden, um die Expression zu beobachten.

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