Anti-CELF1 Kaninchen-Polyclonalkörper für WB, IHC-P, IP, ELISA – Q92879

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CELF1

• CELF1 (CUGBP Elav-ähnliches Familienmitglied 1), auch bekannt als CUGBP1, BRUNOL2 oder EDEN-BP, ist ein 52 kDa großes RNA-bindendes Protein der CELF-Familie. Es zeichnet sich durch drei RNA-Erkennungsmotive (RRMs) aus, die an der posttranskriptionellen Genregulation beteiligt sind.
• Es wirkt breit bei dem alternativen Spleißen von Prä-mRNA und fungiert sowohl als Aktivator als auch als Repressor; Beispielsweise fördert es den Einschluss von Exon 5 der TNNT2-Prä-mRNA (kardiales Troponin T) während der Herzremodellierung und reguliert sich gegenseitig ausschließende Exone in α-Actinin-Transkripten.
• Es reguliert die Translation und Stabilität von mRNA, unter anderem erhöht es die Translation von CEBPB in der alternden Leber und von CDKN1A durch Antagonisierung der reprimierenden Wirkung von CALR3, und es vermittelt die schnelle zytoplasmatische Deadenylierung von Transkripten mit EDEN-Elementen durch Rekrutierung von PARN.
• Es bindet an verschiedene RNA-Motive: (CUG)n-Triplet-Wiederholungen in DMPK, Bruno-Antwortelemente (BREs), AU-reiche Elemente (AREs) in JUN und FOS sowie muskelspezifische Spleiß-Enhancer (MSE)-Stellen in TNNT2.
• Es lokalisiert sowohl im Kern als auch im Zytoplasma, wodurch es sowohl an der nukleären Prä-mRNA-Prozessierung als auch an der Bestimmung des Schicksals von zytoplasmatischer mRNA beteiligt ist.
• Es spielt eine Rolle bei der miRNA-Biogenese durch Bindung an die primäre microRNA pri-MIR140 und reguliert zusammen mit CELF2 deren Prozessierung zur reifen miRNA negativ. Verwandte Referenzen: PMID:28431233
• Es ist posttranslational durch Acetylierung und Phosphorylierung modifiziert und unterliegt der Ubiquitinierung (Isopeptidbindung), was seine Aktivität und Stabilität modulieren kann.
• Es ist in allen menschlichen Geweben weit verbreitet (ubiquitär), was seine grundlegenden Rolle im RNA-Stoffwechsel widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 108–483 umfasst und einen großen Teil von CELF1 abdeckt, einschließlich mehrerer RNA-bindender Domänen; dieser polyklonale Antikörper erkennt wahrscheinlich mehrere Epitope und kann möglicherweise eine robuste Detektion liefern.
• Für die Western-Blot-Analyse (WB) ist eine Bande bei etwa 52 kDa (berechnetes Molekulargewicht) zu erwarten; Validieren Sie die Ergebnisse im relevanten Probesystem mit geeigneten Kontrollen (z. B. Knockdown-/Knockout-Lysate oder Peptid-Blockierung).
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. hitzemediierter Citratpuffer) in Betracht ziehen und eine Verdünnungsreihe des Antikörpers testen, da das Signal je nach Fixierung und Gewebeart variieren kann.
• Bei Immunopräzipitation (IP) und ELISA kann die polyklonale Natur des Antikörpers eine hohe Avidität bieten, aber Nutzer sollten die Leistung unter ihren spezifischen Bedingungen bestätigen, einschließlich der Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Orthologen.
• Aufgrund der nukleären und zytoplasmatischen Lokalisation von CELF1 kann eine subzelluläre Fraktionierung oder eine Co-Färbung durch Doppel-Fluoreszenzmikroskopie helfen, die Spezifität der Detektion zu validieren.

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