Anti-CELF1 monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q92879

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CELF1-Funktion und -Lokalisierung

• CELF1 (CUGBP Elav-ähnliches Familienmitglied 1) ist ein 52 kDa RNA-bindendes Protein, das post-transkriptionelle Ereignisse reguliert, einschließlich alternativen Spleißens von prä-mRNA, mRNA-Translation und mRNA-Stabilität.
• Es vermittelt Exon-Einschluss und/oder -Ausschluss auf gewebespezifische und entwicklungsregulierte Weise. Beispielsweise aktiviert es den Einschluss von Exon 5 des kardialen TNNT2 während der Herzumbildung und steuert das alternative Spleißen von Actinin- und INSR-prä-mRNAs.
• CELF1 erhöht die Translation und beeinflusst die Wahl des Translationsinitiationscodons der CEBPB-mRNA, verstärkt die CDKN1A-Translation durch Antagonisierung von CALR3 und vermittelt eine schnelle zytoplasmatische mRNA-Deaderylierung durch Rekrutierung von PARN an Poly(A)-Schwänze.
• Das Protein bindet an (CUG)n-Triplett-Wiederholungen, Bruno-Antwortelemente (BREs), AU-reiche Elemente (AREs) und muskel-spezifische Spleiß-Enhancer (MSE)-Sequenzen in Ziel-mRNAs.
• CELF1 ist an der miRNA-Biogenese beteiligt: Es bindet an primäre microRNA pri-MIR140 und reguliert zusammen mit CELF2 die Verarbeitung zu reifer miRNA negativ. Verwandte Referenzen: PMID:28431233
• Subzelluläre Lokalisierung: CELF1 kommt sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma vor, was mit seinen Rollen im nukleären Spleißen und der zytoplasmatischen mRNA-Regulation übereinstimmt.
• Gewebespezifität: Ubiquitär exprimiert.
• Post-translationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Isopeptidbindungsbildung, die seine Aktivität und Interaktionen modulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der N-terminalen Region (aa 1-100) entspricht; ziehen Sie diese Information für Epitop-Kartierung oder Blockierungsexperimente in Betracht.
• Für WB ist eine Bande bei ~52 kDa zu erwarten. Optimieren Sie den Gel-Prozentsatz (z.B. 10% SDS-PAGE) und Transferbedingungen für Proteine mittleren Molekulargewichts.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Human, Maus und Ratte validieren Sie den Antikörper in Lysaten dieser Spezies. Schließen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein.
• Für IP verwenden Sie Protein A/G-Kügelchen aufgrund des Kaninchen-IgG-Ursprungs. Bestätigen Sie die Anreicherung durch Western Blot.
• CELF1 unterliegt mehreren PTMs, die zu Bandenverschiebungen führen können; schließen Sie Phosphatase-Inhibitoren im Lysepuffer ein, wenn phosphorylierte Isoformen von Interesse sind.
• Der Antikörper ist für ELISA geeignet; ziehen Sie in Betracht, das Antigen direkt zu beschichten oder ein Capture-Detection-Paar für Sandwich-ELISA zu verwenden.

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