Anti-CEBPA Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P49715

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CEBPA-Funktion und -Lokalisation

• CEBPA (CCAAT/Enhancer-Bindungsprotein alpha, auch bekannt als C/EBP-alpha) ist ein Transkriptionsfaktor, der vom CEBPA-Gen kodiert wird und als Hauptregulator für Proliferationsstillstand und terminale Differenzierung in verschiedenen Zelltypen fungiert, einschließlich myeloider Vorläuferzellen, Adipozyten und Hepatozyten.
• Es bindet direkt an die konservierte DNA-Sequenz 5'-T[TG]NNGNAA[TG]-3' und wirkt als transkriptioneller Aktivator auf verschiedene Zielgene. Verwandte Referenzen: PMID:11242107
• Während der frühen Embryogenese spielt CEBPA zusammen mit CEBPB essentielle und redundante Rollen und ist entscheidend für die ordnungsgemäße Entwicklung von Leber und Lunge (durch Ähnlichkeit).
• Im hämatopoetischen System ist CEBPA unverzichtbar für den Übergang von gemeinsamen myeloischen Vorläuferzellen (CMP) zu Granulozyten/Monozyten-Vorläuferzellen (GMP), einem Schlüsselschritt in der Festlegung der myeloischen Linie (durch Ähnlichkeit).
• Um die terminale Differenzierung von Adipozyten und Granulozyten voranzutreiben, reguliert CEBPA Gene herunter, die einen undifferenzierten und proliferativen Zustand aufrechterhalten, durch Repression von E2F1 – ein Prozess, der eine funktionelle Interaktion mit dem SWI/SNF-Chromatin-Remodellierungskomplex erfordert. Verwandte Referenzen: PMID:14660596
• Alternative Translationsinitiation erzeugt verschiedene Proteinisoformen; Isoform 2 wirkt als dominant-negativer Regulator mit schwächerer Transaktivierungsaktivität und Unfähigkeit, die Zellproliferation zu hemmen. Verwandte Referenzen: PMID:14660596
• CEBPA verstärkt direkt und spezifisch die ribosomale DNA-Transkription, indem es mit RNA-Polymerase I-spezifischen Cofaktoren interagiert und Histonacetylierung induziert – eine Funktion, die mit seiner nukleolären Lokalisation verbunden ist.
• Es lokalisiert überwiegend im Zellkern und Nukleolus, was mit seinen Rollen bei der Transkriptionsregulation sowohl protein-kodierender als auch ribosomaler Gene konsistent ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 111–180 von humanem CEBPA) liegt innerhalb der Transaktivierungsdomäne und ist zwischen Human, Maus und Ratte hochkonserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt. Eine Validierung der Reaktivität in Ihrem Proben-System wird empfohlen.
• Für Western Blot (WB) wird ein Hauptband nahe 38 kDa für die Voll-Längen-Isoform erwartet. Aufgrund alternativer Initiation und posttranslationaler Modifikationen können zusätzliche Banden auftreten. Nuklearextrakte aus Zelllinien mit aktiven CEBPA-Signalwegen (z.B. Hepatom- oder myeloide Zelllinien) werden empfohlen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) ist eine Kernfärbung in Geweben wie Leber, Fettgewebe und Knochenmark zu erwarten. Antigen-Retrieval und Antikörperverdünnung sollten für jeden Gewebetyp optimiert werden.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Die Kombination mit einem geeigneten Detektionsantikörper oder sekundären Konjugat wird für empfindliche Assays empfohlen.

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