Anti-C/EBPα polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P49715

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von C/EBPα

• Proteinidentität und Genfamilie: C/EBPα, kodiert von CEBPA, ist ein basischer Leuzin-Reißverschluss-Transkriptionsfaktor der CCAAT/Enhancer-bindenden Proteinfamilie.
• DNA-Bindung und Transkriptionsaktivierung: Es bindet spezifisch die konsensuale DNA-Sequenz 5'-T[TG]NNGNAA[TG]-3', um die Transkription von Zielgenen zu aktivieren, die an Differenzierung und Stoffwechsel beteiligt sind. Zugehörige Referenzen: PMID:11242107
• Zelldifferenzierung und Proliferationsarrest: C/EBPα ist essenziell für die terminale Differenzierung von myeloischen Vorläufern, Adipozyten, Hepatozyten und anderen Zelltypen und erzwingt den Proliferationsarrest durch E2F1-Repression und Bindung an den SWI/SNF-Komplex. Zugehörige Referenzen: PMID:14660596
• Isoformfunktion: Eine alternative Isoform kann dominant-negativ wirken, bindet DNA mit reduzierter Transaktivierungskapazität und ohne Proliferationshemmung. Zugehörige Referenzen: PMID:14660596
• Gewebespezifische Funktionen: In der Leber reguliert es Glukoneogenese und Lipogenese durch Synergie mit FOXO1 und SREBF1; im Fettgewebe koaktiviert es FOXO1 zur Steuerung der Adipokinexpression.
• rDNA-Transkription und Chromatin: C/EBPα verstärkt die ribosomale DNA-Transkription durch Interaktion mit RNA-Polymerase-I-Cofaktoren und Induktion von Histonacetylierung, was es mit nukleolärer Funktion und Chromatinmodifikation verbindet.
• Subzelluläre Lokalisation: Es befindet sich überwiegend im Kern und Nukleolus, was mit seiner doppelten Rolle bei der mRNA- und rRNA-Synthese übereinstimmt.
• Posttranslationelle Regulation: Die Aktivität wird durch Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung moduliert, wie in UniProt annotiert (Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Acetylierung, Ubl-Konjugation).

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus einem synthetischen Peptid aus der zentralen Region (AS 150–250) von humanem C/EBPα; Sequenzalignment deutet auf eine potenzielle Kreuzreaktivität mit murinem C/EBPα hin, was mit der aufgeführten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Für Western Blot ist eine Bande bei ca. 38 kDa zu erwarten; wir empfehlen die Optimierung der Primärantikörperverdünnung und die Einbindung geeigneter Positivkontrollen (z. B. HepG2- oder 3T3-L1-Lysate).
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Nachweisreagenz verwendet werden; erwägen Sie die Paarung mit einem monoklonalen Fangantikörper für die Entwicklung von Sandwich-ELISAs.
• Da C/EBPα ein Transkriptionsfaktor ist, können Kernextrakte oder Ganzzelllysate die Nachweisempfindlichkeit verbessern.

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