Anti-CDKN1A/p21CIP1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38936

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CDKN1A/p21CIP1

• CDKN1A/p21CIP1 ist ein cyclin-abhängiger Kinase-Inhibitor, der eine kritische Rolle bei der Kontrolle des Zellzyklusfortschritts und der DNA-Schaden-induzierten G2-Arrestierung spielt (PubMed:9106657). Verwandte Referenzen: PMID:9106657
• Das Protein wirkt als Schlüsselmediator der p53/TP53-abhängigen Hemmung der Zellproliferation als Reaktion auf DNA-Schäden und beteiligt sich auch an p53-unabhängigen G2-Arestierungswegen in bestimmten Zelltypen.
• p21 bindet an und hemmt die Aktivität cyclin-abhängiger Kinasen, verhindert die Phosphorylierung kritischer Substrate wie RB1, um den Zellzyklusfortschritt zu blockieren; es erleichtert auch die nukleäre Lokalisierung und Assembly des Cyclin D-CDK4-Komplexes, wobei seine Wirkung auf die Kinaseaktivität stöchiometrieabhängig ist.
• Es hemmt die DNA-Synthese durch Bindung an PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) und Konkurrenz mit POLD3 um die PCNA-Bindung, wodurch die Prozessivität der DNA-Polymerase delta blockiert wird (PubMed:11595739). Verwandte Referenzen: PMID:11595739
• CDKN1A lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Kern, sodass es die Zellzyklusmaschinerie und andere Prozesse in mehreren subzellulären Kompartimenten regulieren kann.
• Ubiquitär in adulten Geweben exprimiert, mit bemerkenswert niedrigeren Spiegeln im Gehirn.
• Das Protein verfügt über eine Zinkfingerdomäne und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die seine Stabilität und Wechselwirkungen modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-164 von humanem p21 umfasst; dieser Bereich umfasst die N-terminale Domäne, die an der CDK- und Cyclin-Bindung beteiligt ist, was potenziell Antikörper liefert, die das native und denaturierte Protein erkennen.
• Für die Western Blot (WB)-Analyse wird eine Bande bei ca. 18 kDa erwartet, die p21 entspricht; aufgrund posttranslationaler Modifikationen können jedoch leichte Verschiebungen beobachtet werden.
• Bei der Durchführung von Immunhistochemie (IHC-P) oder Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann eine Optimierung der Probenvorbereitung und Antigen-Retrieval erforderlich sein, um eine robuste Färbung zu erzielen.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus- und Ratten-p21 wurde festgestellt, es wird jedoch empfohlen, die Spezifität im Zielgewebe oder der Zielzelllinie zu überprüfen.
• Für ELISA-Anwendungen werden vorläufige Checkerboard-Titrationen empfohlen, um die optimale Beschichtungs- und Detektionsantikörperkonzentration zu bestimmen.

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