Anti-CDKN1A/p21CIP1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, ELISA - P38936

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CDKN1A/p21CIP1 Funktion und Lokalisierung

• Cyclin-abhängige Kinase-Inhibitor 1 (p21) ist ein potenter Inhibitor von Cyclin-abhängigen Kinasen, entscheidend für die Kontrolle des Zellzyklusfortschritts an den G1/S- und G2/M-Kontrollpunkten. Verwandte Referenzen: PMID:9106657
• Es vermittelt die p53/TP53-abhängige Hemmung der zellulären Proliferation als Reaktion auf DNA-Schäden und ist auch an der p53-unabhängigen G2-Arretierung durch CREB3L1 in bestimmten Zelltypen wie Astrozyten und Osteoblasten beteiligt.
• p21 bindet an und hemmt Cyclin D-CDK4-, Cyclin E-CDK2- und Cyclin A-CDK2-Komplexe, kann aber in niedriger Stöchiometrie auch die Assemblierung und den Kerntransport von Cyclin D-CDK4-Komplexen erleichtern und so die RB1-Phosphorylierung fördern.
• Es hemmt direkt die DNA-Synthese, indem es mit POLD3 um die Bindung an proliferierendes Zellkernantigen (PCNA) konkurriert und so die DNA-Polymerase-delta-Aktivität blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:11595739
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst sowohl den Zellkern als auch das Zytoplasma, was seine Rollen in der nukleären Zellzyklusregulation und zytoplasmatischen Funktionen widerspiegelt.
• p21 wird in allen adulten Geweben weit verbreitet exprimiert, mit etwa fünffach niedrigeren Werten im Gehirn.
• Das Protein unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität, Lokalisierung und Funktion regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Western-Blot (WB)-Analyse beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 18 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines niedermolekularen Markers und optimieren Sie die Transferbedingungen.
• Validieren Sie bei der Immunpräzipitation (IP) die Effizienz des Antikörpers mit geeigneten positiven Kontrolllysaten, z.B. DNA-Schaden-behandelten Zellen, die p21 exprimieren.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) zeigt p21 sowohl nukleäre als auch zytoplasmatische Lokalisierung; stellen Sie sicher, dass die Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen für beide Kompartimente geeignet sind.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; validieren Sie Linearität und Spezifität mit rekombinantem p21-Protein oder Zelllysaten.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus ist der Antikörper für Studien an Mausgewebe geeignet; überprüfen Sie jedoch die Leistung in Ihren spezifischen Assays.

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