Anti-CDKN1A Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - P39689

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CDKN1A-Funktion und Lokalisation

• CDKN1A (p21) ist ein Cyclin-abhängiger Kinase-Inhibitor aus der Cip/Kip-Familie, ursprünglich identifiziert als CDK-interagierendes Protein, Melanom-Differenzierungs-assoziiertes Protein und ein p53-induzierbarer Faktor.
• Es vermittelt G1/S- und G2-Zellzyklusarrest durch Bindung und Hemmung von Cyclin-abhängigen Kinasen (CDK2, CDK4/6), wodurch die RB1-Phosphorylierung und die E2F1-abhängige Gentranskription blockiert werden (PubMed:36689330). In stöchiometrischen Mengen erleichtert p21 die Cyclin D-CDK4-Assemblierung und den Kernimport, während es in höheren Konzentrationen die CDK4-Kinaseaktivität hemmt (PubMed:25329316). Verwandte Referenzen: PMID:36689330 PMID:25329316
• Es spielt eine zentrale Rolle beim DNA-Schaden-induzierten G2-Arrest durch sowohl p53/TP53-abhängige als auch p53-unabhängige Mechanismen, einschließlich CREB3L1-vermittelten Arrests in Astrozyten und Osteoblasten (PubMed:37178686). Verwandte Referenzen: PMID:37178686
• CDKN1A bindet kompetitiv an PCNA, verdrängt POLD3 und hemmt dadurch die DNA-Synthese durch DNA-Polymerase delta.
• Es lokalisiert sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma, was mit seinen Rollen in der Zellzyklusregulation und der zytoplasmatischen Signalübertragung übereinstimmt.
• Die Expression wurde auf Proteinebene in Keratinozyten bestätigt.
• Mit diesem Protein assoziierte Schlüsselwörter umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, Ubiquitin-Konjugation, Zinkfinger-Domänen und Metallbindung, was eine komplexe posttranslationale Regulation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Kaninchen-polyclonalen Antikörpers verwendete Immunogen ist das vollständige rekombinante Maus-CDKN1A (aa 1-159), von dem erwartet wird, dass es mehrere Epitope sowie sowohl unmodifizierte als auch posttranslational modifizierte Formen von endogenem p21 in Maus- und Rattenproben erkennt.
• Für die Western-Blot-Analyse wird ein 18 kDa-Band vorhergesagt; aufgrund posttranslationaler Modifikationen (z.B. Phosphorylierung, Ubiquitinierung) können jedoch zusätzliche Spezies mit höherem Molekulargewicht oder Bandenverschiebungen beobachtet werden.
• Der Antikörper wird für WB- und ELISA-Anwendungen geliefert. Beim Sandwich-ELISA sollte in Betracht gezogen werden, diesen polyclonalen Antikörper als Detektionsantikörper mit einem validierten Fängerentikörper zu paaren.
• Die p21-Expression ist typischerweise niedrig in sich teilenden Zellen, wird jedoch nach DNA-Schäden stark hochreguliert. Ziehen Sie in Betracht, Proben vor dem Test mit DNA-schädigenden Agenzien (z.B. Etoposid, Doxorubicin) oder Serumentzug zu behandeln, um p21 zu induzieren.

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