Anti-CDK9 Kaninchen monoklonaler Antikörper (KO validiert) für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA – P50750

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK9

• CDK9 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die als katalytische Untereinheit des positiven Transkriptionsverlängerungsfaktor b (P-TEFb)-Komplexes fungiert. Sie phosphoryliert die C-terminale Domäne (CTD) der RNA-Polymerase II, um die Transkriptionsverlängerung zu fördern.
  Zugehörige Referenzen: PMID:10574912 PMID:10757782 PMID:11145967
• CDK9 bildet zudem einen Komplex mit Cyclin-K, der Kinaseaktivität gegenüber der CTD von RNAP II aufweist und für die Erhaltung der Genomintegrität essenziell ist, indem es die Erholung nach Replikationsarrest erleichtert und DNA-Schäden begrenzt.
  Zugehörige Referenzen: PMID:20493174 PMID:21127351
• Es phosphoryliert ein breites Spektrum an Substraten, darunter EP300, MYOD1, AR, die negativen Verlängerungsfaktoren DSIF und NELF sowie Histon H1.4 und reguliert dadurch vielfältige Prozesse wie Muskel Differenzierung, Androgenrezeptor-Signalisierung und Chromatinstruktur.
  Zugehörige Referenzen: PMID:10912001 PMID:11112772 PMID:12037670 PMID:28539972
• P-TEFb ist zudem an kotranskriptionellen Histonmodifikationen, der mRNA-Prozessierung und dem mRNA-Export beteiligt und verbindet die Transkriptionsverlängerung mit der Chromatinremodellierung.
  Zugehörige Referenzen: PMID:15564463 PMID:19575011 PMID:19844166
• CDK9 ist an zytokininduzierten Transkriptionsnetzwerken beteiligt, wie der TNF-induzierten RELA/p65-Aktivierung und der IL-6-induzierten STAT3-Signalisierung, und wird mit viraler Pathogenese und der Vergrößerung von Herzmuskelfzellen in Verbindung gebracht.
  Zugehörige Referenzen: PMID:10393184 PMID:17956865 PMID:18362169 PMID:20081228
• Das Protein lokalisiert im Zellkern und Zytoplasma und kommt außerdem in PML-Körperchen vor – was mit seinen Rollen bei der Transkriptionsregulation und DNA-Reparatur übereinstimmt.
• CDK9 wird gewebesübergreifend ubiquitin exprimiert, was seine grundlegende Rolle bei der Transkription widerspiegelt.
• Weitere Funktionen umfassen die Phosphorylierung von KAT5 zur Förderung der Histonacetyltransferase-Aktivität und die Modulation von Histonmodifikationen wie H2B-Monoubiquitinierung, H3K4-Trimethylierung und H3K36me3.
  Zugehörige Referenzen: PMID:29335245 PMID:15564463

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser monoklonale Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erzeugt, das den Aminosäuren 273-372 von menschlichem CDK9 entspricht – eine Region, die bei Menschen, Mäusen und Ratten wahrscheinlich konserviert ist, was mit der breiten Artkreuzreaktivität übereinstimmt.
• Für den Western Blot ist eine SDS-PAGE-Bande um 43 kDa für CDK9 zu erwarten; posttranslationale Modifikationen oder Spleißvarianten können jedoch zusätzliche Banden erzeugen. Überprüfen Sie das Ergebnis mit geeigneten negativen Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) wird die Titration des primären Antikörpers und die Optimierung der Antigenrückgewinnungsbedingungen empfohlen, um optimale Signal-Rausch-Verhältnisse zu erreichen.
• Die Knockout-Validierung zeigt, dass dieser Antikörper sein Ziel spezifisch erkennt; dennoch sollte jedes Labor den Antikörper im Kontext der eigenen Proben und Assays validieren – idealerweise durch Verwendung von Knockout- oder Knockdown-Kontrollen.
• Dieser Antikörper kann in der Immunpräzipitation (IP) zur Anreicherung von CDK9 und assoziierten Komplexen verwendet werden; für nachfolgende Analysen sollten Sie Antikörper gegen unterschiedliche Epitope verwenden, um Interferenzen zu minimieren.

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