Anti-CDK8 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - P49336

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: CDK8-Funktion und Lokalisation

• CDK8 ist eine Cyclin-abhängige Kinase und ein Kernbestandteil des Mediator-Komplexes, eines Koaktivators, der für die regulierte Transkription fast aller RNA-Polymerase-II-abhängigen Gene essenziell ist.
• Er fungiert als Brücke zwischen genspezifischen regulatorischen Proteinen und der basalen Transkriptionsmaschinerie und dient als Gerüst für den Zusammenbau des Präinitiationskomplexes mit RNA-Polymerase II und allgemeinen Transkriptionsfaktoren.
• CDK8 phosphoryliert die C-terminale Domäne (CTD) der RNA-Polymerase II, was die Bildung des Transkriptionsinitiationskomplexes hemmen und somit als Transkriptionsrepressor wirken kann. Zugehörige Referenzen: PMID:10993082
• Er phosphoryliert CCNH, was zur Herunterregulierung des TFIIH-Komplexes und zur Transkriptionsrepression führt. Zugehörige Referenzen: PMID:10993082
• Durch die Interaktion mit MAML1 hyperphosphoryliert CDK8 die intrazelluläre Domäne von NOTCH, was dessen Abbau fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:15546612
• CDK8 moduliert selektiv die Interferon-Antwort durch Phosphorylierung der STAT1-Transaktivierungsdomäne.
• CDK8 ist vorwiegend im Zellkern lokalisiert, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase mit Aktivator- und Repressorrollen, und genetische Varianten werden mit Autismus-Spektrum-Störungen und geistiger Behinderung in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 364–464 des humanen CDK8, einer Region, die Spezifität verleihen kann; prüfen Sie die Einzigartigkeit des Epitops in Ihrem Zielsystem.
• Optimieren Sie für Western Blotting die Antikörperverdünnung unter Verwendung bekannter CDK8-positiver Lysate (z. B. HeLa- oder HEK293-Zellen) und bestätigen Sie die erwartete Bande bei ca. 53 kDa; geeignete Ladekontrollen sollten einbezogen werden.
• Beschichten Sie für ELISA mit rekombinantem CDK8-Protein oder Zelllysaten und validieren Sie die Signallinearität über einen Konzentrationsbereich; die Kreuzreaktivität mit Maus-CDK8 unterstützt Assays für beide Spezies.
• Da es sich um einen rekombinanten monoklonalen Kaninchen-Antikörper handelt, ist eine hohe Chargenkonsistenz zu erwarten; dennoch sollte die Leistung bei Anwendung unter neuen experimentellen Bedingungen erneut validiert werden.
• Beachten Sie, dass CDK8 an dynamischen Phosphorylierungsprozessen beteiligt ist; ziehen Sie Phosphatase-Inhibitor-Cocktails bei der Probenvorbereitung in Betracht, um Phospho-Signalisierungszustände zu erhalten.

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