Anti-CDK4 Kaninchen PolymAb® für WB, IP, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA – P11802

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK4

• CDK4 (Cyclin-abhängige Kinase 4), auch bekannt als Zellteilungsproteinkinase 4 oder PSK-J3, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die beim Menschen vom CDK4-Gen kodiert wird.
• Als katalytische Untereinheit von Cyclin D-CDK4-Komplexen phosphoryliert und hemmt CDK4 Mitglieder der Retinoblastom(RB)-Proteinfamilie, insbesondere RB1, während des G1/S-Übergangs des Zellzyklus.
• Die Phosphorylierung von RB1 durch CDK4 setzt E2F-Transkriptionsfaktoren frei und ermöglicht die Transkription von Genen, die für den Eintritt in die S-Phase und den Fortschritt des Zellzyklus erforderlich sind.
• CDK4 phosphoryliert auch SMAD3 auf zellzyklusabhängige Weise, hemmt dessen transkriptionelle Aktivität und integriert mitogene und antimitogene Signale.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zellkern und Kernmembran; die Translokation in den Zellkern wird durch den ternären Cyclin D/CDK4/CDKN1B-Komplex erleichtert.
• Schlüsselwörter von UniProt heben seine Rolle bei der ATP-Bindung, im Zellzyklus und der Zellteilung sowie seine Regulation durch Acetylierung und Phosphorylierung hervor; Krankheitsvarianten sind mit Krebs verbunden.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 34 kDa (UniProt: 33,7 kDa), alternatives Spleißen kann zusätzliche Isoformen erzeugen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 204-303 von humanem CDK4 entspricht. Stellen Sie sicher, dass das Ziel-Epitop in Ihrem Assay-Format zugänglich ist; für Western Blotting können denaturierende und reduzierende Bedingungen erforderlich sein.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande um 34 kDa in Lysaten von humanen, Maus- oder Ratten-Zelllinien zu erwarten; bestätigen Sie die Bandenspezifität mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) optimieren Sie das Verhältnis von Antikörper zu Lysat und fügen Sie ein relevantes Kontrollantikörper hinzu, um die Pull-down-Effizienz zu bewerten.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) validieren Sie die Färbemuster anhand der bekannten subzellulären Verteilung von CDK4 (kernständig und zytoplasmatisch) in proliferierenden Zellen.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Paarung mit einem geeigneten Nachweisantikörper und Standardkurven unter Verwendung von rekombinantem CDK4-Protein erforderlich sein.
• Führen Sie immer vorläufige Titrationsexperimente durch, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihre spezifischen Proben und Protokolle zu ermitteln.

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