Polyklonaler Anti-CDK4-Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P11802

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK4

• CDK4 (Cyclin-abhängige Kinase 4), auch bekannt als Zellteilung-Proteinkinase 4 oder PSK-J3, ist eine vom CDK4-Gen kodierte Serin/Threonin-Proteinkinase. Sie ist eine zentrale Komponente der Cyclin-D-CDK4-Komplexe, die den Zellzyklusfortschritt regulieren.
• Als Bestandteil des Cyclin-D-CDK4-Komplexes phosphoryliert und hemmt CDK4 Mitglieder der Retinoblastom-(RB)-Proteinfamilie, einschließlich RB1, während des G1/S-Übergangs. Diese Phosphorylierung führt zur Dissoziation des Transkriptionsfaktors E2F von RB/E2F-Komplexen und ermöglicht die Transkription von E2F-Zielgenen, die für das Durchlaufen der G1-Phase erforderlich sind.
• CDK4 phosphoryliert RB1 in der frühen G1-Phase hypophosphoryliert und fungiert durch seine Aktivität im Cyclin-D-CDK4-Komplex als wichtiger Integrator verschiedener mitogener und antimitogener Signale.
• CDK4 phosphoryliert SMAD3 außerdem auf zellzyklusabhängige Weise und unterdrückt dessen Transkriptionsaktivität, was seine über die RB-Regulation hinausgehende Rolle hervorhebt.
• CDK4 bildet mit Cyclin D und CDKN1B (p27) einen ternären Komplex, der für die nukleäre Translokation und Aktivität des Cyclin-D-CDK4-Komplexes erforderlich ist.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst das Zytoplasma, den Zellkern und die Kernmembran und spiegelt seine dynamische Rolle bei der Regulation des Zellzyklus wider.
• Schlüsselwörter von UniProt weisen auf eine Beteiligung an Acetylierung, alternativem Spleißen, ATP-Bindung, Zellzyklus, Zellteilung und krankheitsbezogenen Varianten hin; es handelt sich um ein Phosphoprotein, das mit krebsbezogenen Signalwegen in Verbindung steht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 200-303 des humanen CDK4, einer Region nahe dem C-Terminus. Dieses Epitop kann die Erkennung bei bestimmten Anwendungen beeinflussen; eine Validierung im jeweiligen experimentellen Kontext sollte in Betracht gezogen werden.
• Beim Western Blot (WB) wird eine Bande bei etwa 34 kDa erwartet. Validieren Sie den Antikörper in humanen und murinen Zelllysaten, die CDK4 exprimieren, da für beide Spezies eine Kreuzreaktivität berichtet wurde.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Färbemuster untersucht werden, entsprechend der subzellulären Lokalisation von CDK4. Geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte sollten einbezogen werden.
• Die Immunpräzipitation (IP) mit diesem polyklonalen Antikörper kann CDK4-Komplexe anreichern; bei der Untersuchung des ternären Komplexes sollte eine Kopräzipitation von Cyclin D oder CDKN1B überprüft werden.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Chargenkonsistenz für quantitative Assays wie ELISA überprüft werden. Führen Sie Titrationsexperimente durch, um die optimalen Arbeitsverdünnungen zu bestimmen.

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