Anti-CDK2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper [KO-validiert] für WB, IHC-P, ELISA - P24941

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CDK2-Funktion und Lokalisierung

• CDK2 (Cyclin-abhängige Kinase 2), auch bekannt als p33-Proteinkinase, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die vom CDK2-Gen kodiert wird (alternativer Name CDKN2). Sie ist für die Meiose essentiell, aber für die Mitose entbehrlich. Verwandte Referenzen: PMID:10499802, PMID:10884347, PMID:10995386

• CDK2 treibt den G1-S-Übergang an, indem es an Cyclin E bindet, um das E2F-Transkriptionsprogramm und die DNA-Synthese zu fördern; später paart es sich mit Cyclin A2, um den S-G2-Fortschritt und den Mitoseeintritt über die Cyclin B/CDK1-Aktivierung voranzutreiben. Verwandte Referenzen: PMID:18372919, PMID:19238148, PMID:19561645

• CDK2 löst die Zentrosomenverdopplung und DNA-Replikation aus, indem es NPM1 phosphoryliert und dessen Dissoziation von nicht verdoppelten Zentrosomen verursacht. Verwandte Referenzen: PMID:11051553

• In der DNA-Schadensantwort reguliert CDK2 die homologe Rekombinationsreparatur durch Phosphorylierung von BRCA2 (niedrig in der S-Phase, hoch, wenn sich Zellen der Mitose nähern) und NBN für die Telomerreparatur. Verwandte Referenzen: PMID:15800615, PMID:20195506, PMID:21319273, PMID:28216226

• Wichtige Phosphorylierungsziele sind RB1 (stört die E2F1-Bindung), MYC (verhindert Ras-induzierte Seneszenz), NPAT (aktiviert die Histon-Gen-Transkription) und EZH2 (erhält die epigenetische Stilllegung von H3K27me3 aufrecht). Verwandte Referenzen: PMID:10499802, PMID:10995386, PMID:10995387, PMID:19966300, PMID:20935635

• CDK2 lokalisiert im Zytoplasma, insbesondere im Zentrosom und in Endosomen, und im Zellkern einschließlich Cajal-Körpern, und pendelt während des Zellzyklus zwischen den Kompartimenten.

• CDK2 spielt eine entscheidende Rolle in embryonalen Stammzellen, indem es ein Gleichgewicht zwischen Proliferation, Zelltod und DNA-Reparatur orchestriert. Verwandte Referenzen: PMID:18372919, PMID:19238148, PMID:19561645

• CDK2 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und S-Nitrosylierung (wie durch UniProt-Schlüsselwörter annotiert), die seine Aktivität und Interaktionen modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid hergestellt, das die Reste 200–298 von humanem CDK2 umspannt. Für Western Blotting sind Banden um die vorhergesagten Molekulargewichte von ~30 kDa und ~34 kDa zu erwarten; verwenden Sie Lysate von Zelllinien wie HeLa oder MCF7 und validieren Sie mit geeigneten Kontrollen.
• Für IHC-P-Anwendungen müssen die Antigen-Retrieval-Bedingungen möglicherweise optimiert werden; bestätigen Sie die Färbespezifität durch Vergleich mit Negativkontrollen oder Knockout-Gewebeschnitten.
• Angesichts seiner Reaktivität mit Human-, Maus- und Rattenproben ist der Antikörper für artenübergreifende Studien geeignet; jedoch sollte die Epitop-Konservierung für nicht-menschliche Ziele überprüft werden.
• Da CDK2 eine zellzyklusabhängige Kinase ist, sollten Sie die Zellzyklus-Synchronisation oder die Behandlung mit Zellzyklus-Inhibitoren in Betracht ziehen, um die Detektion von aktivem CDK2 anzureichern.

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