Anti-CDC27 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P30260

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDC27

• CDC27, auch bekannt als APC3 oder ANAPC3, ist eine Kernuntereinheit des Anaphase-Promoting Complex/Cyclosom (APC/C), einer großen E3-Ubiquitin-Ligase, die für den Fortschritt des Zellzyklus unerlässlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:18485873 PMID:27120157 PMID:27509861
• Der APC/C vermittelt die Ubiquitinierung von Zielproteinen, bildet hauptsächlich Lysin-11-verknüpfte Polyubiquitinketten, aber auch Lysin-48- und Lysin-63-verknüpfte Ketten sowie verzweigte Lysin-11/Lysin-48-Ketten, um den proteasomalen Abbau auszulösen. Verwandte Referenzen: PMID:18485873 PMID:29033132
• Während des Übergangs von der Metaphase zur Anaphase wird der APC/C durch CDC20 aktiviert, was zum Abbau von Cyclin B und Securin führt und dadurch die Chromosomensegregation und den Austritt aus der Mitose antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:27120157 PMID:27509861
• Die APC/C-Aktivität wird streng durch den mitotischen Checkpoint-Komplex (MCC) reguliert, der den APC/C hemmt, bis alle Chromosomen korrekt an der Spindel angeheftet sind, und einen vorzeitigen Beginn der Anaphase verhindert. Verwandte Referenzen: PMID:27509861
• CDC27 lokalisiert im Kern, im Zytoplasma und an der mitotischen Spindel, was mit seinen dynamischen Rollen bei Zellzyklus-Kontrollpunkten und der Chromosomendynamik übereinstimmt.
• Das Protein enthält TPR-Wiederholungen und wird phosphoryliert, was seine regulatorischen Interaktionen und posttranslationale Kontrolle innerhalb des APC/C-Holozyms unterstreicht.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, die die funktionelle Vielfalt von CDC27 in verschiedenen zellulären Kontexten erweitern.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 702–824 des menschlichen CDC27, eine Region, die wahrscheinlich auf dem nativen Protein exponiert ist; dieses Design begünstigt möglicherweise den Nachweis sowohl endogener als auch rekombinanter Formen im WB.
• Im WB ist eine Bande nahe 92 kDa zu erwarten; bestätigen Sie die Spezifität mit geeigneten Positivkontrollen (z. B. HeLa-Zelllysat) und Negativkontrollen und erwägen Sie die Verwendung einer Ladekontrolle.
• Für ELISA-Anwendungen validieren Sie die Bindung an die spezifische Epitopregion oder das vollständige CDC27, um die Empfindlichkeit und Spezifität des Assays sicherzustellen.
• Kreuzreaktivität mit murinem CDC27 ist angegeben; testen Sie in relevanten Mausgewebs- oder Zelllinienproben, wenn Sie auf murine Orthologe abzielen.

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