Anti-CDC20 Polykonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q12834

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDC20

• CDC20 ist ein substratspezifischer Adapter und Aktivator des Anaphase-promoting Complex/Cyclosoms (APC/C), das Substrate für Ubiquitinierung und Degradation markiert. Zugehörige Referenzen: PMID:9734353 PMID:27030811 PMID:29343641

• Es ist essenziell für den Metaphase/Anaphase-Übergang, indem es Cyclin B und Securin zum Abbau dirigiert. Zugehörige Referenzen: PMID:27120157 PMID:27509861 PMID:32666501

• Erkennt Destruktionsbox (D-Box), KEN-Box und ABBA-Motive auf Substraten und ermöglicht so die spezifische Erkennung. Zugehörige Referenzen: PMID:29343641 PMID:27509861

• Bestandteil des mitotischen Checkpoint-Komplexes (MCC), der APC/C hemmt, bis Chromosomen korrekt an der mitotischen Spindel gebunden sind. Zugehörige Referenzen: PMID:27509861

• Der MCC umfasst CDC20, MAD2L1, BUB1B und BUB3; er verzögert den Metaphase/Anaphase-Übergang. Zugehörige Referenzen: PMID:9811605 PMID:9637688 PMID:27509861

• Wenn der Spindel-Checkpoint stillgelegt wird, wird CDC20 im MCC auto-ubiquitiniert, wodurch APC/C für die Anaphase reaktiviert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:27509861

• Subzellulär lokalisiert sich CDC20 während der Mitose im Zytoplasma, am Zentrosom, am Kinetochor und an der Spindelpol.

• CDC20 enthält WD-Wiederholungen und wird durch Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung reguliert; Mutationen sind mit Krankheiten assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 1–270) deckt die N-terminale Region ab, die an der Substraterkennung beteiligt sein kann; der Antikörper kann sowohl native als auch denaturierte Formen erkennen.
• Für den Western Blot ist eine Bande nahe 55 kDa zu erwarten; verwenden Sie zur Anreicherung von CDC20 ggf. mitotische Zelllysate.
• Bei der Immunfluoreszenz sollte eine Färbung an mitotischen Strukturen wie Kinetochoren und Spindelpolen beobachtet werden; validieren Sie in synchronisierten Zellen.
• Die Kreuzreaktivität mit der Maus erlaubt Untersuchungen in Mausmodellen; überprüfen Sie bei Bedarf die Reaktivität in Ihrer spezifischen Linie.
• Für ELISA optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und die Antikörper-Titration für Ihr Assay-Format.
• Als polyklonaler Antikörper ist Chargenvariabilität möglich; führen Sie geeignete Kontrollen durch und erwägen Sie bei Bedarf eine Affinitätsreinigung.

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