Anti-CDC16 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q13042

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CDC16-Funktion und -Lokalisation

• CDC16 (APC6) ist eine Kernkomponente des Anaphase-fördernden Komplexes/Zyklosoms (APC/C), einer E3-Ubiquitin-Ligase, die Schlüsselregulatoren des Zellzyklus für den proteasomalen Abbau markiert PMID:18485873. Verwandte Referenzen: PMID:18485873
• Der APC/C katalysiert hauptsächlich die Bildung von Lys-11-verknüpften Polyubiquitinketten und kann verzweigte Lys-11/Lys-48-verknüpfte Ketten auf Substraten assembliert PMID:18485873 PMID:29033132. Verwandte Referenzen: PMID:18485873 PMID:29033132
• Die Aktivierung des APC/C durch CDC20 am Übergang von der Metaphase zur Anaphase löst den Abbau von Cyclin B und Securin aus, um den Austritt aus der Mitose voranzutreiben PMID:27120157 PMID:27509861. Verwandte Referenzen: PMID:27120157 PMID:27509861
• Der mitotische Checkpoint-Komplex (MCC) hemmt den APC/C, um die Chromosomensegregation zu verzögern, bis alle Chromosomen korrekt angeheftet sind PMID:27509861. Verwandte Referenzen: PMID:27509861
• CDC16 lokalisiert im Zytoplasma, am Zentrosom und am mitotischen Spindelapparat, was mit seiner Rolle in der Zellteilung übereinstimmt.
• Das Protein enthält mehrere TPR-Wiederholungsmotive und ist phosphoryliert, was wahrscheinlich die APC/C-Assemblierung und Interaktionen mit Substraten und Kofaktoren reguliert.
• Alternatives Spleißen führt zu Isoformen, die gewebespezifische oder kontextabhängige APC/C-Funktionen vermitteln können.

Experimentelle Leitfäden und technische Tipps

• Das Immunogen (Rest 371–620) umfasst eine Region, die voraussichtlich oberflächenexponiert ist und an TPR-vermittelten Proteininteraktionen beteiligt ist; berücksichtigen Sie dies bei der Planung orthogonaler Validierungsexperimente.
• Für Western Blot ist ein Band nahe 72 kDa zu erwarten; phosphorylierte Formen können leichte Verschiebungen zeigen. Verwenden Sie geeignete Protease- und Phosphataseinhibitoren während der Lyse.
• Optimieren Sie bei der Immunhistochemie (IHC-P) die Antigen-Demaskierung und Antikörperverdünnung; validieren Sie die Färbemuster unter Verwendung bekannter Positiv- und Negativkontrollgewebe.
• Für ELISA-Anwendungen testen Sie den Antikörper sowohl als Capture- als auch als Detektionsantikörper gegen rekombinantes CDC16 oder APC/C-Komplexe; schließen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen ein.
• Bestätigen Sie aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte die Spezifität in der Zielspezie, falls verfügbar, mittels Knockdown- oder Knockout-Kontrollen.

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