Anti-CDC16-Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13042

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CDC16-Funktion und Lokalisation

• CDC16 (APC6) ist eine Kerneinheit des Anaphase-fördernden Komplexes/Zyklosoms (APC/C), einer mehrteiligen E3-Ubiquitin-Ligase, die für den Zellzyklusfortschritt essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:18485873
• APC/C vermittelt die Ubiquitinierung und anschließende proteasomale Degradation wichtiger Zellzyklusregulatoren, katalysiert primär 'Lys-11'-verknüpfte Polyubiquitinketten und in geringerem Maße 'Lys-48'- und 'Lys-63'-verknüpfte Ketten. Es kann auch verzweigte 'Lys-11'/'Lys-48'-Ketten auf Substraten assembliert. Verwandte Referenzen: PMID:18485873, PMID:29033132
• Die Aktivierung von APC/C durch CDC20 in der Metaphase löst den Abbau von Securin und Cyclin B aus, fördert den Übergang zur Anaphase und den mitotischen Austritt. Verwandte Referenzen: PMID:27120157, PMID:27509861
• Die APC/C-Aktivität wird durch den mitotischen Checkpoint-Komplex (MCC) gehemmt, um eine genaue Chromosomensegregation sicherzustellen, bis alle Kinetochoren korrekt angeheftet sind. Verwandte Referenzen: PMID:27509861
• CDC16 lokalisiert während der Zellteilung im Zytoplasma, an Zentrosomen und am mitotischen Spindelapparat, was mit seiner Rolle in der mitotischen Regulation übereinstimmt.
• CDC16 gehört zu einer Familie von APC/C-Untereinheiten, die durch Tetratricopeptid-Wiederholungsdomänen (TPR) charakterisiert sind, die Protein-Protein-Interaktionen vermitteln.
• Das Protein wird phosphoryliert, was seine Aktivität oder Interaktionen innerhalb des Komplexes regulieren kann.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 200-300 des humanen CDC16 umfasst. Diese interne Sequenz könnte für den Nachweis von vollständigem CDC16 in Western-Blot-Anwendungen geeignet sein. Obwohl nicht in der Standardanwendungsliste enthalten, sollte eine Validierung für denaturierende Proteinanalysen in Betracht gezogen werden, angesichts des vorhergesagten Molekulargewichts von ~72 kDa.
• Für IHC-P sollte eine hitzeinduzierte Antigen-Demaskierung (z.B. Citratpuffer, pH 6.0) in Betracht gezogen und die Primärantikörperkonzentration optimiert werden.
• Bei IF/ICC ist eine ordnungsgemäße Fixierung (z.B. 4% Paraformaldehyd) und Permeabilisierung sicherzustellen, um Zugang zum zytoplasmatischen und zentrosomalen CDC16 zu ermöglichen.
• ELISA kann zur Quantifizierung von CDC16 verwendet werden; titrieren Sie den Antikörper und validieren Sie die Kreuzreaktivität mit Ihrer Zielart (Human, Maus, Ratte).

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