Anti-CD99-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P14209

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD99-Funktion und -Lokalisierung

• CD99, auch bekannt als MIC2 oder T-Zell-Oberflächenglykoprotein E2, ist ein stark glycosyliertes Transmembranprotein, das zur CD99-Familie gehört. Es unterliegt einem alternativen Spleißen, wodurch mehrere Isoformen entstehen.
• Das Protein wird hauptsächlich auf der Oberfläche von T-Zellen exprimiert, wo es die Zell-Zell-Adhäsion vermittelt. Es ist an der spontanen Rosettenbildung zwischen T-Zellen und Erythrozyten beteiligt, einem klassischen immunologischen Phänomen.
• CD99 spielt eine kritische Rolle bei der Leukozyten-Extravasation, speziell in dem Schritt, in dem Leukozyten durch die endotheliale Basalmembran transmigrieren. Es funktioniert am gleichen Ort wie PECAM-1, aber unabhängig davon.
• Das Protein ist als Typ-I-Transmembranprotein in der Plasmamembran lokalisiert, wobei eine extrazelluläre Domäne die adhäsiven Wechselwirkungen vermittelt und ein kurzer cytoplasmatischer Schwanz an der Signalgebung beteiligt ist.
• CD99 unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und umfangreicher Glycosylierung, die seine Funktion und sein Molekulargewicht modulieren. Das reife Glykoprotein läuft bei etwa 32 kDa im SDS-PAGE, obwohl das Kernproteingewicht bei ca. 19 kDa liegt.
• Strukturuntersuchungen (3D-Struktur) haben Einblicke in die molekulare Basis der CD99-vermittelten Adhäsion gegeben, und die direkte Proteinsequenzierung hat seine Identität und Verarbeitung bestätigt.
• Obwohl am besten in T-Zellen charakterisiert, wird CD99 auch auf anderen Leukozyten und Endothelzellen exprimiert und trägt zur immunologischen Überwachung und Entzündungsreaktionen bei.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen für diesen polyklonalen Antikörper entspricht der N-terminalen extrazellulären Region (aa 23–124), die einen Teil der Adhäsionsdomäne umfasst. Für den WB kann dieser Antikörper Banden nachweisen, die unterschiedlich glycosylierten Isoformen entsprechen; erwägen Sie einen Entglycosylierungsschritt, um die Größe des Kernproteins zu bestätigen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper verwendet werden, um natives CD99 in Zelllysaten oder gereinigten Proteinpräparationen zu erfassen oder nachzuweisen. Eine Optimierung der Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen wird empfohlen, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Für Gewebe- oder Zellfärbungen validieren Sie den Antikörper im entsprechenden menschlichen Probenystem (z. B. Jurkat-T-Zellen, periphere Blutmononukleärzellen) und fügen Sie geeignete Kontrollen wie isotypengleiches IgG oder peptidblockierte Proben hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.

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