Anti-CD95/FAS monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P25445

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD95/FAS-Funktion und -Lokalisation

• CD95/FAS ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie (TNFRSF6), auch bekannt als Apo-1-Antigen oder Apoptose-vermittelndes Oberflächenantigen FAS.
• Es fungiert als Rezeptor für TNFSF6/FASLG und rekrutiert nach Ligandenbindung FADD und Caspase-8, um den Todes-induzierenden Signalkomplex (DISC) zu bilden und Apoptose einzuleiten.
• Die FAS-vermittelte Apoptose spielt eine Rolle bei der Induktion peripherer Toleranz und dem antigen-stimulierten Suizid reifer T-Zellen.
• Das Gen produziert durch alternatives Spleißen mehrere Isoformen; die sezernierten Isoformen 2 bis 6 können Apoptose in vitro blockieren.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zellmembran, Membranrafts und sezernierte Formen; die isoform-spezifische Lokalisation beeinflusst die Signalgebung.
• In ruhenden mononukleären Zellen des peripheren Blutes werden Isoform 1 und Isoform 6 gleich stark exprimiert; nach Aktivierung nimmt Isoform 1 zu, während Isoform 6 abnimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Palmitoylierung, Phosphorylierung und Disulfidbindungsbildung, die zur Rezeptorfunktion und -stabilität beitragen.
• Mutationen in FAS sind mit dem autoimmunen lymphoproliferativen Syndrom (ALPS) assoziiert, was seine essentielle Rolle in der Immunhomöostase unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 26-173), daher wird erwartet, dass der Antikörper die membrangebundenen und möglicherweise sezernierten Isoformen von CD95/FAS erkennt.
• Für Western Blot sind aufgrund von alternativem Spleißen, Glykosylierung und Spaltung mehrere Banden zwischen 9-38 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Verwendung reduzierender Bedingungen und geeigneter Molekulargewichtsmarker.
• Bei IF/ICC lokalisiert CD95/FAS hauptsächlich an der Plasmamembran und in Membranrafts; optimieren Sie die Permeabilisierung, wenn intrazelluläre Pools nachgewiesen werden sollen.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen Proben-/Zellsystem, da die Expressionslevel je nach Zelltyp und Aktivierungszustand variieren können.

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