Anti-CD90.1-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – P01831

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Thy-1-Membranglykoproteins

• Das Thy-1-Membranglykoprotein, auch als CD90 bekannt, ist ein GPI-verankertes Zelloberflächenprotein, das zur Immunglobulinsuperfamilie gehört.
• Bei Mäusen existiert Thy-1 als zwei wichtige allelische Varianten, Thy1.1 (CD90.1) und Thy1.2 (CD90.2); dieser Antikörper erkennt das CD90.1-Allel, wie durch das Design des Immunogens vorgegeben.
• Thy-1 kann Zell-Zell- oder Zell-Ligand-Interaktionen vermitteln, insbesondere während der Synaptogenese und anderer Prozesse im Gehirn (basierend auf der funktionellen Annotation von UniProt).
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert und über einen Glykosylphosphatidylinositol-(GPI-)Anker befestigt, der es zu Lipid-Rafts dirigiert.
• Es enthält eine einzelne Immunglobulin-V-Typ-Domäne, weist eine Disulfidbindung auf und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Glykosylierung und der Bildung von N-terminaler Pyrrolidoncarbonsäure.
• Das reife Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 18 kDa (basierend auf dem UniProt-Eintrag), was mit der beobachteten Bande von etwa 18 kDa in der SDS-PAGE unter reduzierenden Bedingungen übereinstimmt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Dieser kaninchen-polyklonale Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fusionsprotein hergestellt, das die Aminosäuren 20–120 des murinen CD90.1 (NP_033408.1) umfasst und die extrazelluläre immunglobulinähnliche Domäne einschließt.
• Beim Western Blot (WB) wird in murinen Geweben oder Zelllinien, die CD90.1 exprimieren, eine Bande von etwa 18 kDa erwartet. Die Verwendung geeigneter Positiv- und Negativkontrollen (z. B. Gewebe aus Thy1.1- bzw. Thy1.2-Mausstämmen) wird empfohlen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsantikörper verwendet werden; optimale Beschichtungskonzentrationen und Titer sollten empirisch bestimmt werden.
• Polykolonale Antikörper können eine Chargen-zu-Chargen-Variabilität aufweisen; wir empfehlen, jede neue Charge im vorgesehenen Assaysystem zu validieren.
• Die GPI-vermittelte Zelloberflächenlokalisation von Thy-1 kann schonende Lysebedingungen erfordern, um die Löslichkeit zu erhalten. Bei einer Membranfraktionierung sollten nicht denaturierende Detergenzien in Betracht gezogen werden.
• Die Antikörperspezifität kann durch Immunpräzipitation in Kombination mit Massenspektrometrie oder durch Tests an Lysaten aus CD90.1-Knockout-Zellen bzw. -Geweben bestätigt werden, sofern verfügbar.
• Wie empfohlen lagern (Versand mit Kühlakku; Langzeitlagerung bei -20 °C oder -80 °C) und wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, um die Aktivität zu erhalten.

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