Anti-CD8a monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01732

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD8a-Funktion und -Lokalisierung

• CD8a ist ein T-Zell-Oberflächenglykoprotein, das als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle dient und zytotoxischen T-Lymphozyten ermöglicht, infizierte oder Tumorzellen zu erkennen und zu eliminieren.
• Es existiert entweder als Heterodimer mit CD8B oder als Homodimer und wird auf Thymozyten, zytotoxischen T-Zellen, NK-Zellen, Gedächtnis-T-Zellen und intraepithelialen Lymphozyten exprimiert.
• CD8a bindet gleichzeitig an den T-Zell-Rezeptor (TCR) und MHC-Klasse-I-Proteine, rekrutiert die LCK-Kinase, um Signalsubstrate für die T-Zell-Aktivierung, Zytokinproduktion und Adhäsion zu phosphorylieren.
• In NK-Zellen unterstützen CD8A-Homodimere das Überleben und die seriöse Abtötung von Zielzellen, während sie in aktivierten Lymphozyten die Differenzierung in Gedächtnis-CD8+ T-Zellen fördern.
• Das Protein ist ein Single-Pass-Typ-I-Membranprotein, aber eine sezernierte Isoform existiert; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Transkripte.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbrückenbildung, N-Glykosylierung und Palmitoylierung, die es an Lipid Rafts verankern.
• Gewebsspezifität: Wird auf einer Untermenge von Immunzellen exprimiert und auf plasmazytoiden dendritischen Zellen nach Stimulation mit Herpes-simplex-Virus-1 hochreguliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 22–182) von humanem CD8A, was diesen Antikörper für die Detektion von Oberflächen-CD8a mittels Durchflusszytometrie geeignet macht.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie Standardprotokolle zur Oberflächenfärbung mit entsprechend titriertem Antikörper; erwägen Sie die Verwendung von Lebend/Tot-Diskriminierung und geeigneten Isotypkontrollen.
• Validieren Sie die Reaktivität in relevanten Zellsystemen wie menschlichen PBMCs oder Cynomolgus-Affen-Lymphozyten, da eine Kreuzreaktivität angegeben ist.
• Je nach Versuchsaufbau können die Fixierungs-/Permeabilisierungsschritte optimiert werden, wenn eine intrazelluläre Färbung erforderlich ist.
• Überprüfen Sie bei Multiplex-Panels die Kompatibilität der Fluorophore und potenzielle sterische Hindernisse mit anderen Markern im CD8-Korezeptorkomplex.

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