Anti-CD86 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, FC, ELISA - P42081

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD86-Funktion und -Lokalisierung

• CD86 (B7-2, LAB72) ist ein kostimulatorisches Molekül, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört und eine wesentliche Rolle bei der Aktivierung von T-Lymphozyten spielt, indem es als Ligand für den CD28-Rezeptor fungiert und das primäre Hilfssignal für die Priming naiver T-Zellen liefert. Verwandte Referenzen: PMID:12196291, PMID:7694363

• Dieses Molekül ist entscheidend für die frühe Entscheidung zwischen T-Zell-Immunität und Anergie, die innerhalb von 24 Stunden nach der Aktivierung erfolgt, und beeinflusst dadurch die adaptiven Immunantworten. Verwandte Referenzen: PMID:7527824

• CD86 fungiert auch als Hemmer der T-Zell-Aktivierung durch Bindung an CTLA4, welches CD28 verdrängt und die CD28-vermittelte Kostimulation blockiert, wobei es als Ablenkungsrezeptor wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:11279501

• In B-Zellen aktiviert die Bindung von CD86 an CD40 den NF-kappa-B-Signalweg über Phospholipase C und Proteinkinase C und reguliert die IgG1-Produktion (nach Homologie).

• Es kann als Rezeptor für die Adenovirus-Untergruppe B dienen und den Eintritt des Virus erleichtern (mikrobielle Infektion).

• CD86 ist auf der Zellmembran lokalisiert und wird auf der Oberfläche professioneller antigenpräsentierender Zellen exprimiert. Es verfügt über eine Immunglobulin-V-Set-Domäne, ein Signalpeptid, eine Transmembranhelix, Disulfidbindungen und N-verknüpfte Glykosylierungsstellen. Das theoretische Molekulargewicht beträgt ca. 37,7 kDa, was mit der beobachteten 38 kDa-Bande übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 20–241, was der extrazellulären Domäne von humanem CD86 entspricht. Es wird erwartet, dass dieser Antikörper das native Oberflächenprotein erkennt, was ihn für die Durchflusszytometrie (FC) und die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) an lebenden Zellen geeignet macht.
• Für Western Blot (WB) wandert CD86 bei ~38 kDa. Erwägen Sie die Verwendung von reduzierenden Bedingungen und validieren Sie die Bande in stimulierten antigenpräsentierenden Zellen (z. B. dendritische Zellen oder B-Zellen), wo CD86 hochreguliert ist.
• In ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper zum Nachweis oder zur Detektion von löslichem CD86 oder in zellbasierten Assays verwendet werden. Eine Titration und die Kombination mit anderen Klonen werden empfohlen.
• Der Antikörper ist spezifisch für humanes CD86. Über Kreuzreaktivitäten mit murinem oder rattem CD86 wurde nicht berichtet; validieren Sie dies bei Bedarf im entsprechenden Probenmaterial.
• Um den Nachweis zu verbessern, kann die Aktivierung antigenpräsentierender Zellen mit Stimuli wie LPS, CD40L oder Zytokinen die Oberflächenexpression von CD86 signifikant hochregulieren.

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