Anti-CD81 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P60033

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD81

• CD81, auch bekannt als TAPA-1 oder Tspan-28, ist ein 26 kDa großes Protein der Tetraspaninfamilie, das tetraspaninangereicherte Mikrodomänen (TERMs) organisiert, die für Rezeptorclustering und Signalgebung entscheidend sind.
• In B-Zellen ist CD81 essenziell für die Oberflächenexpression von CD19 und die BCR-Signaltransduktion, wodurch die Schwelle für antigenausgelöste Aktivierung und Antikörperproduktion gesenkt wird.
  Zugehörige Referenzen: PMID:15161911, PMID:20237408, PMID:27881302
• In T-Zellen erleichtert es die Lokalisation von CD3-Zeta an synaptischen Verbindungen und fördert die Th2-Polarisierung.
  Zugehörige Referenzen: PMID:22307619, PMID:23858057, PMID:8766544
• CD81 fungiert als Rezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) in Hepatozyten und wird außerdem von Plasmodium falciparum-Sporozoiten für die Leberinfektion genutzt.
• Es reguliert homotypische und heterotypische Zellfusion: Es hemmt die Multinukleation von Makrophagen und die Myotubbildung, während es die Spermien-Ei-Fusion positiv moduliert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:12796480
• Lokalisiert an der Zellmembran und basolateralen Membran; exprimiert in B-Zellen, Hepatozyten, Makrophagen und T-Zellen.
  Zugehörige Referenzen: PMID:20237408, PMID:12483205, PMID:12796480, PMID:22307619
• Enthält multiple Transmembranhelices, eine Disulfidbindung und lipidbindende Motive; beteiligt an Wirts-Virus-Interaktionen und adaptiver Immunität.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den Aminosäuren 114-199 von humanem CD81 entspricht – eine Region, die wahrscheinlich an der extrazellulären Schleife exponiert ist, sodass Antikörper entstehen können, die die native Konformation erkennen. Erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers in Anwendungen, bei denen endogenes CD81 nachgewiesen werden soll.
• Für Western Blot wird eine standardmäßige reduzierende SDS-PAGE mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von 26 kDa erwartet; Glykosylierung oder andere posttranslationale Modifikationen können jedoch zu Bandenverschiebungen führen. Validieren Sie den Nachweis in Ihren relevanten Zelllysaten.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) kann Antigen-Retrieval mit Citratpuffer pH 6,0 und Nachweis mit chromogenen Substraten getestet werden; eine positive Färbung ist in Geweben wie lymphoiden Organen und der Leber zu erwarten.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann eine Permeabilisierung mit 0,1 % Triton X-100 und eine Blockierung mit Serum, das zum Sekundärantikörper passt, das Signal-Rausch-Verhältnis verbessern. Die Membranlokalisation von CD81 sollte punktförmig oder diffus auf der Zelloberfläche erscheinen.
• ELISA-Anwendungen können mit diesem polyclonalen Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz entwickelt werden; paarern Sie ihn bei Bedarf mit einem monoklonalen Anti-CD81 für Sandwich-Assays.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte weist auf eine konservierte Epitopsequenz hin; bestätigen Sie immer die Spezifität in Ihrem experimentellen System unter Verwendung geeigneter Kontrollen.

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