Anti-CD79a-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P11912

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD79a

• CD79a, auch als Ig-alpha oder MB-1-Membranglykoprotein bekannt, ist die Alpha-Kette des B-Zell-Antigenrezeptor-(BCR-)Komplexes und für die Entwicklung und Funktion von B-Zellen unerlässlich.
• CD79a kooperiert mit CD79B, um nach der Antigenbindung an den BCR die Signalkaskade zu initiieren, die zur Internalisierung, zum Transport zu späten Endosomen und zur Antigenpräsentation führt.
• CD79a ist für die Oberflächenexpression des BCR und für die effiziente Differenzierung von Pro-B- und Prä-B-Zellen erforderlich.
• Es stimuliert die Autophosphorylierung und Aktivierung von SYK und bindet an BLNK, um dessen Phosphorylierung durch SYK zu erleichtern und dadurch die nachgeschaltete Signalübertragung zu integrieren.
• CD79a interagiert außerdem mit einigen Tyrosinkinasen der Src-Familie und erhöht deren Aktivität; zudem unterdrückt es die BCR-Signalübertragung während der Entwicklung unreifer B-Zellen.
• Das Protein enthält eine Immunglobulindomäne und eine Transmembranhelix und unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung, Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung.
• Es wird spezifisch in B-Zellen exprimiert und ist in der Zellmembran lokalisiert.
• Es existieren alternativ gespleißte Isoformen, und das reife Protein hat ein Molekulargewicht von ungefähr 25 kDa (berechnet ca. 25 kDa), was mit der beobachteten Bande übereinstimmt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 165–225 des menschlichen CD79A (NP_001774.1) und zielt auf die zytoplasmatische Domäne ab. Daher eignet sich der Antikörper zum Nachweis von Gesamt-CD79A unter denaturierenden und nativen Bedingungen in Ganzzelllysaten.
• Bei der Western-Blot-Analyse (WB) sollte eine spezifische Bande bei ungefähr 25 kDa beobachtet werden. Es wird empfohlen, reduzierende Bedingungen zu verwenden und das erwartete Molekulargewicht mit geeigneten Molekulargewichtsmarkern zu überprüfen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) kann ein Schritt zur Antigenretrieval-Analyse die Färbeleistung optimieren. Testen Sie den Antikörper an lymphatischen Geweben mit hohem B-Zell-Anteil (z. B. Tonsille, Milz) als Positivkontrollen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF-P) ist eine Permeabilisierung der Zellen erforderlich, damit der Antikörper auf das intrazelluläre Epitop zugreifen kann. Eine Kofärbung mit einem B-Zell-Marker (z. B. CD19 oder CD20) kann bei Lokalisationsstudien hilfreich sein.
• Für ELISA-Anwendungen kann das rekombinante Immunogen als Beschichtungsantigen verwendet werden. Aufgrund der Sequenzkonservierung sollte die Kreuzreaktivität mit CD79A von Maus und Ratte experimentell bestätigt werden.
• Bei der Verwendung mit Maus- oder Rattenproben sollte die Kreuzreaktivität im jeweiligen experimentellen System überprüft werden, da das Immunogen eine hohe Homologie zu diesen Spezies aufweist.

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