Anti-CD69 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q07108

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD69-Funktion und -Lokalisierung

• CD69 ist ein Rezeptor für C-Typ-Lektine vom Typ II mit Transmembrandomäne, auch bekannt als AIM, EA1, MLR-3, CLEC2C, GP32/28, BL-AC/P26 und Leu-23. Er wird schnell auf der Oberfläche von aktivierten T-Zellen, B-Zellen, natürlichen Killerzellen, Neutrophilen, Eosinophilen, epidermalen Langerhans-Zellen und Blutplättchen hochreguliert.
• Es reguliert die Differenzierung von Th17-Zellen negativ durch eine kohlenhydratabhängige Interaktion mit Galectin-1/LGALS1 auf unreifen dendritischen Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:24752896
• CD69 kooperiert mit dem auf peripheren Blutzellen vorhandenen S100A8/S100A9-Komplex, um die Umwandlung von naiven CD4-T-Zellen in regulatorische T-Zellen zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:26296369
• Als Rezeptor für oxidiertes Low-Density-Lipoprotein (oxLDL) in CD4-T-Lymphozyten reguliert es Entzündungen negativ, indem es die PDCD1-Expression durch NFAT-Aktivierung induziert. Verwandte Referenzen: PMID:35930205
• In aus Fettgewebe gewonnenen mesenchymalen Stammzellen (ASCs) erkennt CD69 spezifisch P. aeruginosa und löst die ERK1-Aktivierung aus, was zur Sekretion von Granulozyten-Makrophagen-Kolonie-stimulierendem Faktor (GM-CSF) und entzündungsfördernden Zytokinen führt und so zur Abwehr des Wirts beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:34841721
• CD69 reguliert die chemotaktischen Reaktionen von Effektor-Lymphozyten und dendritischen Zellen auf Sphingosin-1-phosphat (S1P) negativ, indem es als S1PR1-Agonist wirkt und die Internalisierung und den Abbau des Rezeptors erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:37039481
• Das Protein befindet sich hauptsächlich auf der Zellmembran als disulfidverbrücktes Homodimer und unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung und Phosphorylierung.
• Es wird auf verschiedenen Immunzelluntergruppen exprimiert und spielt eine Rolle bei der IL-10-Produktion von Eosinophilen über den ERK1/2-Weg, obwohl eine weitere Validierung in spezifischen Modellsystemen empfohlen wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 62–199 von humanem CD69 (NP_001772.1), was der extrazellulären Domäne entspricht. Dieser Bereich ist zwischen Mensch und Ratte konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität erklärt.
• Für Western Blot (WB) wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande um 23 kDa erwartet; aufgrund der Glykosylierung kann jedoch ein höheres Molekulargewicht beobachtet werden. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen in Ihr Versuchsdesign ein.
• Bei ELISA-Anwendungen sollten Sie je nach Anforderung der Assay direkte, indirekte oder Sandwich-Formate in Betracht ziehen. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihr spezifisches Protokoll zu ermitteln.
• Da CD69 nach Stimulation transient exprimiert wird, kann eine Aktivierung der Zielzellen (z. B. mit PMA/Ionomycin für T-Zellen) notwendig sein, um das Protein zu detektieren. Validieren Sie die Detektionsbedingungen in Ihren relevanten biologischen Proben.

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