Anti-CD68 Kaninchen PolymAb® für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34810 / P31996

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD68

• Makrosialin (CD68) ist ein stark glykosyliertes transmembranes Glykoprotein der Familie der lysosomassoziierten Membranproteine (LAMP), auch bekannt als Lamp4, gp110 und Scard1. Das Core-Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von ~37 kDa, aber extensive N- und O-verknüpfte Glykosylierung ergibt eine scheinbare Größe von 70–130 kDa im SDS-PAGE.
• CD68 wird überwiegend auf den Endosom- und Lysosommembranen von Monozyten und Gewebsmakrophagen exprimiert, wo es an der Phagozytose und dem intrazellulären lysosomalen Stoffwechsel beteiligt ist.
• Durch die Bindung an gewebs- und organspezifische Lektine oder Selektine erleichtert CD68 das Homing von Makrophagen zu Entzündungs- oder Verletzungsstellen und kann das Kriechen von Zellen auf selekinbeschichteten Substraten durch schnelles Recycling zwischen endolysosomalen Kompartimenten und der Plasmamembran ermöglichen.
• Neben Makrophagen wird CD68 in geringeren Mengen in Lymphozyten, Fibroblasten, Endothelzellen und vielen Tumorzelllinien exprimiert, was potenziell die Anheftung von Tumorzellen an das vaskuläre Endothel und die metastatische Ausbreitung unterstützt.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Disulfidbindungbildung, starke Glykosylierung und ein spaltbares Signalpeptid, die zu seiner Reifung und Membranvermittlung beitragen.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen von CD68, und sein Funktionsrepertoire wird durch Interaktionen mit Komponenten der extrazellulären Matrix und Zelladhäsionsrezeptoren weiter erweitert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das sowohl humanes als auch murines CD68 abdeckt, was auf eine breite Kreuzreaktivität hindeutet; dennoch sollten Forscher die Reaktivität in ihren spezifischen Probensystemen validieren.
• Für Western Blot (WB) ist aufgrund der variablen Glykosylierung eine breite Bande zwischen 70 und 130 kDa zu erwarten; verwenden Sie eine Positivkontrolle wie Makrophagenlysate und erwägen Sie die Verwendung von 8–12%igen SDS-PAGE-Gelen für eine optimale Auflösung.
• Bei IHC-P und IF/ICC kann eine effektive Detektion eine Antigenrettung (hitze- oder enzymbasiert) und Permeabilisierungsschritte erfordern, um die intrazelluläre endosomale/lysosomale Lokalisierung zugänglich zu machen.
• Für ELISA ist die Paarung mit einem kompatiblen Detektionsantikörper unerlässlich; CamelBio bietet validierte Antikörperpaare zur Unterstützung einer schnellen Assay-Entwicklung an.
• Da CD68 ein gut etablierter Makrophagenmarker ist, kann eine Doppelfärbung mit anderen Linienmarkern (z. B. CD163, CD11b) helfen, Makrophagen-Subpopulationen in Gewebeschnitten abzugrenzen.

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