Anti-CD63 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P08962

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD63-Funktion und -Lokalisierung

• CD63 ist ein Mitglied der Tetraspanin-Superfamilie, auch bekannt als Granulophysin, LAMP-3, ME491 und Tspan-30, und spielt vielfältige Rollen bei der Zelladhäsion, Signalübertragung und dem vesikulären Transport.
• Es fungiert als Oberflächenrezeptor für TIMP1 und aktiviert die nachgeschaltete Signalübertragung über ITGB1/Integrin-Wege, die das Zellüberleben, die Migration und die Reorganisation des Zytoskeletts über AKT, FAK/PTK2 und MAP-Kinasen fördern.
• CD63 beteiligt sich an der VEGFA-Signalübertragung durch Regulation der Internalisierung von KDR/VEGFR2 und ist für den normalen Transport der luminalen Domäne von PMEL erforderlich, was für die Entwicklung und Reifung von Melanozyten essenziell ist.
• Das Protein ist in der Zellmembran, den lysosomalen und späten endosomalen Membranen, multivesikulären Körpern und Melanosomen lokalisiert und kann auf extrazellulären Exosomen sezerniert werden, was seine Beteiligung sowohl an intrazellulärem Transport als auch an der interzellulären Kommunikation widerspiegelt.
• CD63 ist stark glykosyliert und palmitoyliert, mit einem beobachteten Molekulargewicht zwischen 17 kDa und 25 kDa aufgrund variabler Glykosylierung, was für seinen Transport und funktionelle Wechselwirkungen kritisch ist.
• Die Gewebeexpression ist in Thrombozyten, Melanozyten (dysplastische Nävi, primäre Melanome), hämatopoetischen Zellen und Gewebemakrophagen prominent, was seine Relevanz in der Krebs- und Immunzellbiologie unterstreicht.
• Es trägt zur Extravasation von Leukozyten bei, indem es den Transport von SELP an die Endotheloberfläche reguliert, und kann die Degranulation von Mastzellen spezifisch durch Ms4a2/FceRI-Stimulation modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für das Western Blotting bereiten Sie Proben unter reduzierenden Bedingungen vor und beachten Sie, dass CD63 aufgrund seiner heterogenen Glykosylierung als diffuses Band oder mehrere Bänder zwischen 17–25 kDa wandert; validieren Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) werden robuste Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. Citratpuffer, pH 6,0, wärmeinduziert) aufgrund der Transmembran-Natur des Antigens empfohlen; testen Sie an bekannten positiven Geweben wie Melanom oder thrombozytenreichen Schnitten.
• Für ELISA-Anwendungen kombinieren Sie diesen Antikörper mit passend nachgewiesenen Detektionsreagenzien und bestätigen Sie Linearität und Empfindlichkeit unter Verwendung von rekombinantem CD63-Standard oder biologischen Proben wie Zelllysaten oder Exosom-Präparationen.
• Da das Immunogen der großen extrazellulären Schleife (Aminosäuren 103-203) entspricht, erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein Epitop, das unter nativen und denaturierten Bedingungen zugänglich ist; berücksichtigen Sie dies bei der Gestaltung von Capture- oder Detektionsstrategien.

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