Anti-CD59 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P13987

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD59-Funktion und Lokalisierung

• Das CD59-Glykoprotein (auch bekannt als Protectin, HRF20, MACIF, MIRL, MAC-IP) ist ein Zelloberflächeninhibitor des Komplement-Membranangriffskomplexes (MAC).
• Es hemmt wirksam den MAC-Aufbau, indem es an die C8-Komponenten (C8A und C8B) bindet und die Einfügung von C9 in die sich bildende Pore verhindert, wodurch menschliche Zellen vor der Komplement-vermittelten Lyse geschützt werden. Verwandte Referenzen: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Eine lösliche Form von CD59, die im Urin gefunden wird, behält die Komplementbindung bei, zeigt jedoch eine stark reduzierte MAC-hemmende Aktivität auf Zellmembranen.
• CD59 ist über eine Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-Bindung an der Plasmamembran verankert und auch als sekretiertes Protein nachweisbar.
• Das Protein durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen, einschließlich N-verknüpfter Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Glykierung, die zu seiner strukturellen Stabilität und Funktion beitragen.
• Ein genetischer Mangel an CD59 ist mit hereditärer hämolytischer Anämie assoziiert, was seine kritische Rolle beim Schutz der Erythrozyten vor Komplementangriff unterstreicht.
• Das CD59-Gen unterliegt alternativem Spleißen, was zu mehreren Transkriptvarianten führt, die zur funktionellen Vielfalt beitragen können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der reifen CD59-extrazellulären Domäne (aa 26–128), was darauf hindeutet, dass der Antikörper hauptsächlich die native, GPI-verankerte Form auf Zelloberflächen und lösliche Formen ohne GPI-Anker erkennt.
• Für die Western-Blot-Analyse von humanen Zell- oder Gewebelysaten ist eine Bande bei etwa 14 kDa zu erwarten; N-Glykosylierung kann jedoch zu einer verbreiterten Bande oder einem leicht höheren scheinbaren Molekulargewicht führen. Erwägen Sie die Verwendung reduzierender Bedingungen und validieren Sie mit geeigneten Kontrollen.
• In ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper entweder zum Antigen-Einfang oder zum Nachweis von CD59 in humanem Serum, Plasma oder rekombinanten Proteinpräparationen verwendet werden. Titrationsexperimente (z. B. 1–5 µg/mL Beschichtung) werden empfohlen, um die Signal-Rausch-Verhältnisse zu optimieren.
• Als polyklonales Reagenz sollten Sie die Spezies-Kreuzreaktivität experimentell bestätigen, wenn Sie nicht-menschliche Modelle untersuchen, und geeignete Negativkontrollen einschließen, um unspezifische Bindung zu berücksichtigen.

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