Anti-CD45 polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IP, IF/ICC, ELISA - P08575

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD45-Funktion und Lokalisation

• CD45 (Rezeptor-Typ Tyrosin-Protein-Phosphatase C), auch bekannt als Leukozyten-Common-Antigen (L-CA), LY5, B220 und T200, wird durch das PTPRC-Gen kodiert. Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen.
• Es ist ein entscheidender positiver Regulator der T-Zell-Aktivierung über den Antigenrezeptor. Die erste Phosphatase-Domäne besitzt katalytische Aktivität, während die zweite die Substratspezifität moduliert. Zugehörige Referenzen: PMID:35767951
• CD45 dephosphoryliert wichtige Signalmoleküle: Bei der T-Zell-Aktivierung rekrutiert und dephosphoryliert es SKAP1 und FYN und moduliert die LYN-Aktivität. Die Interaktion mit CLEC10A an der Schnittstelle zwischen dendritischen Zellen und T-Zellen moduliert die Aktivierungsschwelle, um Autoreaktivität zu begrenzen.
• Es fungiert als Rezeptor für das humane Zytomegalievirus-Protein UL11, vermittelt die Bindung an T-Zellen und beeinträchtigt die TCR-Signalübertragung und Proliferation.
• Subzellulär lokalisiert sich CD45 in der Zellmembran, in Membran-Rafts und in der immunologischen Synapse. Es ist umfassend glykosyliert und phosphoryliert.
• Gewebespezifische Isoform-Expression: Die Isoformen 1, 2, 3, 5 und 7 werden in Thymozyten nachgewiesen, während die Isoformen 4, 6 und 8 nicht vorhanden sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) wird eine Bande bei ca. 147 kDa erwartet; validieren Sie den Antikörper in geeigneten Leukozyten-Lysaten von Mensch, Maus oder Ratte.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) kann eine Anreicherung von CD45 erreicht werden; Co-Immunpräzipitations-Experimente erfordern möglicherweise eine Optimierung der Lyse- und Waschbedingungen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC und IF-P) sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden; die Oberflächenfärbung von CD45 kann ohne Permeabilisierung durchgeführt werden.
• Das Immunogen (AS 611–730) liegt innerhalb der extrazellulären Region, was auf eine potenzielle Eignung für die Oberflächenfärbung lebender Zellen hindeutet, obwohl eine Validierung empfohlen wird.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte macht diesen Antikörper zu einem Kandidaten für speziesübergreifende Studien; überprüfen Sie die Spezifität immer im jeweiligen Probensystem.

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