Anti-CD40L Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P29965

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD40L-Funktion und -Lokalisierung

• CD40L fungiert als entscheidender Zytokinligand für CD40 (TNFRSF5) auf antigenpräsentierenden Zellen, essentiell für die T-Zell-abhängige humorale Immunität (PubMed:1280226, PubMed:31331973). Verwandte Referenzen: PMID:1280226 PMID:31331973
• Es liefert kostimulatorische Signale an T-Zellen, verstärkt die Proliferation und die Produktion von Zytokinen wie IL-4 und IL-10 nach TCR/CD3-Vernetzung und CD28-Kostimulation (PubMed:8617933). Verwandte Referenzen: PMID:8617933
• Die Vernetzung von CD40L löst den NF-kappa-B-Weg sowie die Aktivierung der Kinasen MAPK8 und PAK2 aus und induziert die Tyrosinphosphorylierung von CD28-Isoform 3 in T-Zellen (PubMed:15067037). Verwandte Referenzen: PMID:15067037
• Es vermittelt die B-Zell-Proliferation, den Immunglobulin-Klassenwechsel und die IgE-Produktion in Gegenwart von IL-4 und hebt damit seine Rolle bei der B-Zell-Aktivierung hervor.
• CD40L ist auch ein Integrinligand für ITGA5:ITGB1 und ITGAV:ITGB3, der zusammen mit CD40 arbeitet, um Signalergebnisse wie die B-Zell-Aktivierung und anti-apoptotische Antworten zu regulieren.
• Das Protein ist an der Zellmembran und Zelloberfläche lokalisiert und kann gespalten werden, um eine sezernierte Form zu produzieren; es wird spezifisch auf aktivierten CD4+ T-Lymphozyten exprimiert.
• Mit einer berechneten molekularen Masse von ~29,3 kDa erhöht die Glykosylierung die beobachtete Größe auf etwa 33–39 kDa in seiner vollständigen, aktiven Form.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 113–261 und deckt die extrazelluläre TNF-Homologiedomäne ab, die für die Rezeptorbindung kritisch ist; dieses Design kann eine Reaktivität gegenüber sowohl membrangebundenen als auch löslichen Formen von CD40L verleihen.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von unglykosyliertem CD40L ~29 kDa, aber glykosylierte Formen können bei etwa 33–39 kDa erscheinen; überprüfen Sie die Bandspezifität mithilfe von Lysaten aktivierter T-Zellen oder rekombinanten Proteinkontrollen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie erwägen, den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz zu verwenden, gepaart mit einem validierten, passenden CD40L-Antikörperpaar, und optimieren Sie die Beschichtung mit rekombinantem CD40L-Protein oder zellbasierten Assays.
• Eine Kreuzreaktivität mit humanem und murinem CD40L wurde berichtet; validieren Sie dies vor der Verwendung in der ausgewählten Spezies und im Assay-System.

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