Anti-CD4 monoklonaler Antikörper () für Durchflusszytometrie - P01730

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD4-Funktion und -Lokalisierung

• CD4 ist ein integrales Membranglykoprotein, das als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle dient und eine zentrale Rolle bei der T-Zell-Aktivierung und Immunreaktionen spielt.
• Nach Bindung des TCR rekrutiert CD4 die Src-Kinase LCK in den TCR-CD3-Komplex und leitet intrazelluläre Signalkaskaden ein, die die Lymphokinproduktion, Adhäsion und Differenzierung von T-Helferzellen fördern.
• CD4 ist ein primärer Rezeptor für HIV-1 und erleichtert den Eintritt des Virus; es ist auch ein Rezeptor für das humane Herpesvirus 7 (HHV-7). Verwandte Referenzen: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026, PMID:17346169, PMID:7909607
• Im Thymus beteiligt sich CD4 an der Entwicklung von T-Helferzellen und löst auch die Differenzierung von Monozyten zu Makrophagen aus.
• CD4 wird stark auf T-Helferzellen exprimiert und ist auch auf Makrophagen, dendritischen Zellen und NK-Zellen vorhanden.
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert und enthält extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche Domänen, eine transmembrane Helix und einen zytoplasmatischen Schwanz, der einer Palmitoylierung und Phosphorylierung unterliegt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das -Konjugat spektrale Eigenschaften ähnlich wie FITC/Alexa Fluor 488 aufweist, ist es kompatibel mit Standard-488-nm-Laserlinien für die Durchflusszytometrie.
• Da das Immunogen die extrazelluläre Domäne (aa 26–207) umfasst, erkennt der Antikörper wahrscheinlich ein extrazelluläres Epitop, was ihn für die Färbung lebender Zellen ohne Permeabilisierung geeignet macht.
• Erwägen Sie eine Titrierung des Antikörpers, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen, die das beste Signal-Rausch-Verhältnis für Ihren spezifischen Probentyp bietet.
• Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu, wie z. B. humane periphere Blutmononukleäre Zellen (PBMCs) oder bekannte CD4+ und CD4- Zelllinien, um die Spezifität zu bestätigen.
• Vermeiden Sie eine längere Lichteinwirkung, um die Stabilität des Fluorophors zu erhalten; lagern Sie den Antikörper für die kurzfristige Verwendung bei 2–8 °C lichtgeschützt und aliquotieren und frieren Sie ihn für die langfristige Lagerung bei ‑20 °C ein.
• Als monoklonaler Antikörper bietet er eine konsistente Charge-zu-Charge-Leistung und minimalem Hintergrund.

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