Anti-CD3G Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB - P09693

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD3G

• CD3G ist die Gamma-Kette des CD3-T-Zell-Korezeptors, ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie und eine Kernkomponente des TCR-CD3-Komplexes auf T-Lymphozyten.
• Der TCR-CD3-Komplex ist zentral für die adaptive Immunität; nach Antigenerkennung übertragen CD3-Ketten (CD3D, CD3E, CD3G und CD247) Aktivierungssignale über ihre zytoplasmatischen Immunrezeptor-Tyrosin-basierten Aktivierungsmotive (ITAMs). Diese ITAMs werden durch die Src-Familienkinasen LCK und FYN phosphoryliert, wodurch nachgeschaltete Signalkaskaden initiiert werden (PubMed:2470098). Zugehörige Referenzen: PMID:2470098
• CD3G wird für die dynamische Regulation der TCR-Oberflächenexpression benötigt. Seine zytoplasmatische Domäne enthält ein Di-Leucin-basiertes (diL) Sortierungsmotiv, das das konstitutive TCR-Zyklus steuert und so für korrekte Rezeptorlevel auf der Plasmamembran sorgt (PubMed:8187769). Zugehörige Referenzen: PMID:8187769
• Das Protein ist ein einfach durchlaufendes Typ-I-Membranprotein, das auf der Zellmembran lokalisiert ist, mit einem Signalpeptid, einer extrazellulären Immunglobulin-ähnlichen Domäne, einer Transmembranhelix und einem zytoplasmatischen Schwanz.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung von ITAM-Tyrosinen nach T-Zellaktivierung, wodurch es sich um ein Phosphoprotein handelt.
• CD3G wird auf T-Lymphozyten exprimiert und spielt eine entscheidende Rolle bei der T-Zellentwicklung und -funktion; Mutationen sind mit Immundefizienz (IMD17) verbunden.
• Es enthält Disulfidbindungen und ist ein Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von etwa 20 kDa (berechnet 20.469 Da aus UniProt; beobachtet ~20 kDa per SDS-PAGE).

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen wurde gegen ein synthetisches Peptid entworfen, das den Aminosäuren 83–182 von humanem CD3G (P09693) entspricht und einen Teil der extrazellulären Domäne sowie potenziell die Transmembranregion abdeckt. Diese Region ist hochkonserviert, was die nachgewiesene Kreuzreaktivität mit Maus unterstützt.
• Für Western Blot ist unter reduzierenden Bedingungen eine spezifische Bande bei etwa 20 kDa zu erwarten. Verwenden Sie Lysate aus T-Zelllinien (z. B. Jurkat) als Positivkontrolle.
• Bei IHC-P und IF/ICC optimieren Sie Protokolle zur Antigenrückgewinnung und Permeabilisierung und validieren Sie das Membranfärbemuster in T-zellreichen Geweben (z. B. Lymphknoten, Milz).
• Für ELISA evaluieren Sie den Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz, nachdem Sie die Reaktivität in Ihrem Assaysystem bestätigt haben.
• Wie bei jedem Antikörper führen Sie geeignete Kontrollen durch und titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitsverdünnung für Ihre spezifische Versuchsanordnung zu bestimmen.

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