Monoklonaler Anti-CD352/SLAMF6-Antikörper für WB, IHC-P, FC, ELISA – Q96DU3

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD352/SLAMF6

• SLAMF6 (auch als NTB-A, Ly108 oder CD352 bezeichnet) ist ein Mitglied der Familie der Signaling-Lymphocytic-Activation-Molecule-(SLAM)-Proteine und fungiert als Rezeptor mit Selbstligandeneigenschaft, der sowohl angeborene als auch adaptive Immunantworten durch homo- oder heterotypische Zell-Zell-Interaktionen moduliert.
• SLAMF6 löst spezifisch in natürlichen Killerzellen (NK-Zellen), die eine hohe Oberflächendichte von Rezeptoren der natürlichen Zytotoxizität exprimieren, zytolytische Aktivität aus. Zugehörige Referenzen: PMID:11489943 PMID:16920955
• Die positive Signalübertragung in NK-Zellen umfasst die Phosphorylierung von VAV1 und ist vom Adapterprotein SH2D1B/EAT-2 abhängig. Zugehörige Referenzen: PMID:16920955
• In T-Lymphozyten fördert SLAMF6 die Differenzierung in Richtung des Th17-Phänotyps, was über die Rekrutierung von RORC zum IL-17-Promotor zu einer erhöhten IL-17-Sekretion führt; diese kostimulatorische Aktivität erfordert SH2D1A/SAP. Zugehörige Referenzen: PMID:16920955 PMID:22184727 PMID:22989874
• Zusammen mit SLAMF1 und CD84/SLAMF5 kann SLAMF6 als negativer Regulator der humoralen Immunantwort wirken; bei Fehlen von SH2D1A/SAP kann es inhibitorische Signale an CD4+-T-Zellen und NKT-Zellen übertragen.
• SLAMF6 reguliert die Bildung von Keimzentren negativ, indem es die T-Zell-B-Zell-Adhäsion hemmt; diese Funktion steht mit einer verstärkten Rekrutierung der Phosphatase PTPN6/SHP-1 in Zusammenhang.
• Das Protein ist ein einzelnes Transmembran-Glykoprotein vom Typ I, das sich an der Zellmembran befindet. Es wird von allen ruhenden und aktivierten NK-Zellen, T-Zellen und B-Lymphozyten exprimiert; bei T-Zellen von Patienten mit systemischem Lupus erythematodes (SLE) wurde eine erhöhte Oberflächenexpression beschrieben. Zugehörige Referenzen: PMID:11489943 PMID:22184727
• SLAMF6 unterliegt alternativem Spleißen, wodurch mehrere Isoformen entstehen; es wird durch N-Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung an wichtigen Tyrosinresten innerhalb seiner immunrezeptor-tyrosinbasierten Switch-Motive (ITSMs) modifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 24–215) des humanen SLAMF6; der monoklonale Kaninchenantikörper sollte in der Durchflusszytometrie das nativ an der Zelloberfläche exprimierte Protein erkennen und sich möglicherweise für Immunfluoreszenz- sowie funktionelle Blockierungsstudien eignen.
• Beim Western-Blot sind spezifische Banden bei etwa 24 kDa (für einige Isoformen vorhergesagt) und 37 kDa (alternativ gespleißte/glykosylierte Formen) zu erwarten; validieren Sie die beobachteten Molekulargewichte in Ihrem Lysat.
• Für die Immunhistochemie (paraffineingebettetes Gewebe, IHC-P) führen Sie eine Antigen-Rückgewinnung mit Citratpuffer (pH 6,0) durch und optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers anhand eines bekannten positiven Kontrollgewebes (z. B. Tonsille oder Lymphknoten).
• Für die Durchflusszytometrie verwenden Sie 0,5–1 µg Antikörper pro einer Million Zellen in einem Färbevolumen von 100 µL; stellen Sie die Zelllebensfähigkeit sicher, da SLAMF6 ein Oberflächenmarker ist.
• Beim Aufbau eines ELISA-Nachweissystems kombinieren Sie den Antikörper mit einem passenden Capture-/Detektionsantikörperpaar oder verwenden Sie diesen rekombinanten monoklonalen Antikörper als Detektionsreagenz in einem Sandwich-Format.

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