Anti-CD34 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28906

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD34-Funktion und -Lokalisierung

• CD34 ist ein hämatopoetisches Vorläuferzellantigen, das möglicherweise als Adhäsionsmolekül fungiert. Es vermittelt die Anheftung von Stammzellen an die extrazelluläre Matrix des Knochenmarks oder direkt an Stromazellen und erleichtert so die frühe Hämatopoese.
• Fungiert als Gerüst für linienspezifische Glykane, wodurch Stammzellen an Lektine auf Stromazellen oder andere Knochenmarkkomponenten binden können. Es präsentiert auch Kohlenhydratliganden an Selektine.
• Lokalisiert in der Membran, konsistent mit seiner Rolle bei der Zelladhäsion und Signalübertragung.
• Selektiv exprimiert auf hämatopoetischen Vorläuferzellen und dem Endothel kleiner Gefäße verschiedener Gewebe, was seine Spezifität unterstreicht.
• Das Protein ist ein Glykoprotein mit einem Signalpeptid und einer einzelnen Transmembranhelix und unterliegt alternatives Spleißen und Phosphorylierung.
• Schlüsselwörter umfassen Zelladhäsion, Glykoprotein, Membran und Phosphoprotein und unterstreichen seine strukturellen und funktionalen Merkmale.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 32-290 von humanem CD34 abdeckt und einen großen Teil der extrazellulären Domäne umfasst. Es wird erwartet, dass dieser polyklonale Antikörper mehrere Epitope innerhalb dieses Bereichs erkennt, was ihn robust für die Detektion von denaturiertem oder nativem CD34 macht.
• Für Western Blotting (WB) wird eine Bande um 41 kDa erwartet. Reduzierende Bedingungen und geeignete Ladekontrollen sollten verwendet werden, und das Membranblocking sollte optimiert werden, um den Hintergrund zu minimieren.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigenretrisierung erforderlich sein, um Epitope freizulegen. Die Einbeziehung von Gewebeschnitten, von denen bekannt ist, dass sie CD34 exprimieren (z. B. Knochenmark oder Endothelzellen), wird zur Validierung empfohlen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine Permeabilisierung erforderlich, um intrazelluläre Epitope zugänglich zu machen, obwohl die extrazelluläre Domäne in nicht fixierten lebenden Zellen ohne Permeabilisierung erkannt werden kann.
• In ELISA kann das immunisierende Peptid oder das rekombinante Protein als Positivkontrolle dienen, um die Antikörperreaktivität zu bestätigen.

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