Anti-CD324/E-Cadherin polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P09803

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Cadherin-1-Funktion und Lokalisierung

• Cadherin-1 (CDH1, E-Cadherin) ist ein kalziumabhängiges Zelladhäsionsprotein, das homophile Wechselwirkungen vermittelt und so zur Zellsortierung und zur Aufrechterhaltung der Integrität von Epithelgewebe beiträgt (PubMed:11976333). Verwandte Referenzen: PMID:11976333
• Es reguliert die Mobilität und Proliferation von Epithelzellen und fungiert als potenter Tumorinvasionssuppressor.
• CDH1 fördert die Organisation radialer Aktinfasern an Zellverbindungen über die Interaktion mit Angiomotin-like 2 (AMOTL2) und erleichtert den frühen Desmosomenaufbau durch die Rekrutierung von Desmoglein-2 (DSG2) und Desmoplakin (DSP).
• Das Protein lokalisiert hauptsächlich an Adhärenzverbindungen und Desmosomen der Zellmembran, kommt aber auch in Endosomen, dem trans-Golgi-Netzwerk und dem Zytoplasma vor.
• CDH1 ist in nicht-neuralen Epithelgeweben weit verbreitet; auf Proteinebene wird es in epidermalen Keratinozyten ab der Geburt, inneren und äußeren Pfeilerzellen der Hörschnecke (Organ of Corti) und Granulomamakrophagen nachgewiesen (PubMed:30639848, PubMed:27760340, PubMed:18079750, PubMed:27375112, PubMed:30660666). Verwandte Referenzen: PMID:30639848 PMID:27760340 PMID:18079750 PMID:27375112 PMID:30660666
• Es wurde gezeigt, dass ein C-terminales proteolytisches Fragment, E-Cad/CTF2, den nicht-amyloidogenen Abbau von Amyloid-beta-Vorläufern fördert und die Produktion von APP C99- und C83-Peptiden hemmt.
• Maus-CdH1 dient nicht als Rezeptor für Listeria monocytogenes Internalin A (InlA); eine einzige Änderung eines Oberflächenrests kann die Anfälligkeit für die bakterielle Aufnahme verleihen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Spaltung an basischen Resten, Disulfidbindungsbildung, Glykosylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 157–369 innerhalb der extrazellulären Cadherin-Wiederholungsdomänen; die polyklonale Natur kann zur Erkennung mehrerer Epitope und zum Nachweis sowohl der Voll- als auch der prozessierten E-Cadherin-Formen führen.
• Beim Western Blot ist ein vorherrschendes Band nahe 98 kDa zu erwarten; ziehen Sie die Verwendung von Epithelzelllinien wie MCF-7 (human) oder 4T1 (Maus) als positive Kontrollen in Betracht und validieren Sie mit geeigneten Ladekontrollen.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitsverdünnung zu bestimmen, und schließen Sie Kalziumionen in die Assay-Puffer ein, um die native E-Cadherin-Konformation zu erhalten.
• Angesichts der berichteten Kreuzreaktivität mit humanem und murinem Protein sollten Sie die Spezifität in Ihrem spezifischen Probentyp überprüfen; die endogene Expression kann zwischen verschiedenen Epithelgeweben variieren.
• Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Tau-Zyklen; aliquotieren und lagern Sie bei empfohlenen Temperaturen nach Erhalt, da die Versandbedingung (Eisbeutel) eine kurzfristige Stabilität während des Transports impliziert.

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