Anti-CD31/PECAM1 monoklonaler Antikörper (APC/Cyanine7) für Durchflusszytometrie - Q08481

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD31/PECAM1-Funktion und -Lokalisierung

• Das plättchenendotheliale Zelladhäsionsmolekül (PECAM1/CD31) ist ein Transmembran-Glykoprotein und Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie, das aufgrund von alternatives Spleißen in mehreren Isoformen (z. B. ~69, 77, 80 und 81 kDa) exprimiert wird.
• PECAM1 spielt eine kritische Rolle bei der transendothelialen Migration von Leukozyten (TEM) unter entzündlichen Bedingungen; Tyr-679 ist für den Transport in das laterale Grenz-Recycling-Kompartiment und eine effiziente TEM unerlässlich.
• Das Protein vermittelt sowohl homophile (PECAM1-PECAM1) als auch heterophile (z. B. mit CD177) Wechselwirkungen an Endothelverbindungen und trägt zur Zell-Zell-Adhäsion und Neutrophilen-Transmigration bei.
• Durch homophile Verknüpfung überträgt PECAM1 ein Ablösungssignal, das die makrophagenvermittelte Phagozytose lebensfähiger Leukozyten verhindert, während es das Andocken und die Phagozytose apoptotischer Leukozyten fördert.
• PECAM1 moduliert die Aktivierung des Bradykinin-Rezeptors BDKRB2 und reguliert die ERK1/2-Signalgebung in Endothelzellen als Reaktion auf Bradykinin und hyperosmotischen Schock.
• Genetische Studien verknüpfen PECAM1 mit der Entwicklung von Arteriosklerose; es induziert die Anfälligkeit für die Bildung arteriosklerotischer Läsionen. Verwandte Referenzen: PMID:19048083
• Subzellulär lokalisiert sich PECAM1 an der Zellmembran, den Membran-Rafts und den Zellverbindungen, was konsistent mit seinen Adhäsions- und Signalfunktionen ist.
• Bei der Maus wird das PECAM1-Protein in Lunggewebe und Blutplättchen exprimiert, was seine vaskulären und hämatopoetischen Rollen hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 18–220 von Maus-CD31) zielt auf die N-terminale extrazelluläre Region ab, die wahrscheinlich auf lebenden Zellen zugänglich ist; berücksichtigen Sie dies bei der Gestaltung von Durchflusszytometrie-Panels mit anderen Oberflächenmarkern.
• Validieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper im relevanten Probensystem unter optimierten Färbebedingungen (z. B. Titer, Inkubationszeit, Temperatur) und fügen Sie geeignete Isotyp- und Viabilitätskontrollen hinzu.
• Wenn Sie CD31 in intrazellulären Kompartimenten oder unter Bedingungen anzielen, unter denen es abgespalten werden kann, bewerten Sie die Notwendigkeit von Fixierungs/Permeabilisierungsprotokollen, während Sie bestätigen, dass das Epitop zugänglich bleibt.
• Angesichts der berichteten multiplen Proteingewichte bestätigen Sie die Spezifität des Konjugats, indem Sie bei Bedarf einen Western Blot unter reduzierenden/nicht-reduzierenden Bedingungen mit einem sekundären Detektionsreagenz durchführen.

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