Anti-CD3 Kaninchen monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P07766

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD3-Funktion und -Lokalisierung

• CD3E kodiert die Epsilon-Kette des T-Zell-Oberflächenglykoproteins CD3, eine Kernkomplex des TCR-CD3-Komplexes auf T-Lymphozyten, die für die adaptive Immunantwort essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Bei der Bindung des TCR an antigenpräsentierende Zellen übertragen die CD3-Ketten (CD3D, CD3E, CD3G und CD247/CD3Z) Signale über die Membran; ihre zytoplasmatischen immunorezeptor-Tyrosin-basierten Aktivierungsmotive (ITAMs) werden durch die Src-Familienkinasen LCK und FYN phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:2470098 PMID:40592325
• Phosphorylierte ITAMs auf CD3E schaffen Andockstellen für ZAP70, was zur Phosphorylierung und Aktivierung von ZAP70 führt, was wiederum die für die T-Zell-Aktivierung erforderlichen downstream-Signalübertragungskaskaden auslöst.
• CD3E spielt eine wesentliche Rolle bei der korrekten T-Zell-Entwicklung und gewährleistet eine ordnungsgemäße Thymozytenreifung (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• Das Protein beteiligt sich an der Internalisierung und der Herabregulierung von TCR-CD3-Komplexen an der Zelloberfläche über Endozytose-Sequenzen, die in seiner zytosolischen Region vorhanden sind. Verwandte Referenzen: PMID:10384095 PMID:26507128
• Neben seiner Korezeptorfunktion dient CD3E als Rezeptor für ITPRIPL1, der die T-Zell-Aktivierung hemmt, indem er die Rekrutierung von NCK1 fördert, wodurch die CD3E-ZAP70-Interaktion gestört und die ERK-NFkB-Signalübertragungskaskade sowie der Calcium-Einstrom blockiert werden. Verwandte Referenzen: PMID:12110186 PMID:38614099
• Die CD3-Epsilon-Kette ist ein Single-Pass-Typ-I-Membranprotein, das an der Zellmembran lokalisiert ist; sie verfügt über eine extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche Domäne, eine transmembrane Helix und einen zytoplasmatischen Schwanz, der ITAMs enthält. Sie unterliegt Phosphorylierung und Disulfidbindung und wird unter Schlagworte wie adaptive Immunität, Rezeptor und Phosphoprotein klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde unter Verwendung der Aminosäuren 1–126 der menschlichen CD3-Epsilon entworfen, was der extrazellulären Domäne entspricht. Dies deutet darauf hin, dass der Antikörper wahrscheinlich ein Epitop bindet, das auf lebenden Zellen zugänglich ist, was ihn gut für die Durchflusszytometrie geeignet macht.
• Für FC-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration zu bestimmen, und fügen Sie geeignete Isotyp-Kontrollen, Lebend/Tot-Diskriminierung und Fc-Rezeptor-Blockierung hinzu, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Angesichts der dokumentierten Kreuzreaktivität mit Cynomolgus- und Rhesusaffen kann der Antikörper für Studien an nicht-menschlichen Primaten in Betracht gezogen werden, aber Benutzer sollten die Leistung in ihrem spezifischen experimentellen System validieren.

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